アポトーシス関連分子を利用した癌に対する分子標的療法の確立

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15025263
• 研究機関: 札幌医科大学
• 研究代表者: 安達 正晃 札幌医科大学, 医学部, 助教授 (70240926)
• キーワード: アポトーシス / 放射線照射 / BH3-only蛋白質 / BAD / caspase-8 / アノイキス

研究概要

申請者は、caspase-8の遺伝子導入、またBH3蛋白であるBADの過剰発現によるアノイキス感受性亢進を証明しこれを利用した転移抑制療法の基盤的研究を行ってきた。これの発展的研究として以下の計画を実施した。
1.癌特異的発現caspase-8アデノウイルスベクターの確立
Cre recombinaseによるアデノウイルスcaspase-8発現ベクター(Adv-caspase-8)をさらに実用化させるために癌細胞でのみ発現させる新しいプロモーターに着目した。Dr.W.Nicol Keith(University of Glasgow)との共同研究により、今年度の成果としてこの新規プロモーターを利用したアデノウイルス発現ベクターの構築に成功した。これをさらに発展させるためにIn vivoでの有効性について検討中である。
2.BADの遺伝子治療への基盤的研究
BADは、足場を喪失するとAKTが不活化され、BADの抑制系が解かれ、活性化される。したがってBADは、転移や播種を抑制する分子として適している。様々な変異型BAD蛋白をPCRを用いて作製し、その機能解析をした結果、BH3ドメイン内において類似アミノ酸への変異により強力なBADへ改変しうることを見出した。
3.ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤を用いた放射線感受性亢進
これらの併用療法として、低分子化合物の同定を目指してスクリーニングを行い、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤がBH3蛋白Bimを増加させ、放射線感受性を亢進させることを見出した。

研究成果

• [文献書誌] Masaaki Adachi: "Synergistic Effect of Histone Deacetylase Inhibitors FK228 and CBHA with Proteasome Inhibitors PSI and PS-341 against Gastrointestinal Adenocarcinoma Cells"Clin Cancer Res. In press. (2004)
• [文献書誌] Yubin Zhang: "Histone Deacetylase Inhibitors FK228, MS-275 and CBHA Augment Radiation-Induced Cell Death in Gastrointestinal Adenocarcinoma Cells"Int J Cancer. In press. (2004)
• [文献書誌] Masaaki Adachi: "Mutation of BAD within the BH3 domain impairs its phosphorylation-mediated regulation."FEBS Lett. 551. 147-152 (2003)
• [文献書誌] Masashi Idogawa: "Overexpression of BAD preferentially augments anoikis."Int J Cancer. 107. 215-223 (2003)
• [文献書誌] Hiroshi Yasui: "Combination of tumor necrosis factor-α with sulindac augments its apoptotic potential and suppresses tumor growth of human carcinoma cells in nude mice."Cancer. 97. 1412-1420 (2003)
• [文献書誌] Atsushi Takamura: "Accumulation of Hsp70/Hsc70 molecular chaperone regulator BAG-1 on COPI-coated structures in gastric epithelial cells."Int.J.Oncol.. 23. 1301-1308 (2003)