2003 年度実績報告書

雌性生殖器官における組織幹細胞システムの分子メカニズムの解明

研究課題

研究課題/領域番号	15039231
研究機関	慶應義塾大学
研究代表者	吉村泰典慶應義塾大学, 医学部, 教授 (10129736)
研究分担者	内田浩慶應義塾大学, 医学部, 助手 (90286534) 丸山哲夫慶應義塾大学, 医学部, 講師 (10209702)
キーワード	子宮内膜 / 幹細胞 / 免疫不全マウス
研究概要	本年度は、ユニークな再生ポテンシャルを保有する子宮内膜組織における成体幹細胞の同定・分離・培養技術の確立について、特に申請時に挙げた以下の点に焦点を絞り検討を行った。 1.子宮内膜幹細胞の同定・分離 (1)他の幹細胞に共通なマーカーによる同定・選別:既知の他臓器幹細胞マーカー(例えば神経幹細胞マーカーMusashi-1等)に対する抗体を用いて免疫組織染色による位置的・時間的な幹細胞局在の確認を行った。しかし既知幹細胞マーカー陽性細胞は、幹細胞が比較的豊富にあると考えられる基底層には必ずしも局在しておらず、内膜組織構成細胞の多様性を考慮に入れた戦略の必要性が判明した。 (2)Side Population (SP)法の応用:Hoechst33342染色によるSP分離方法を用いて、子宮内膜から高い幹細胞活性を持つことが予想される細胞集団の同定分離を試みた。内膜組織からのSP細胞分離条件の検討を重ねた結果、安定的にSP細胞を分離する方法を確立した。 2.選別細胞が幹細胞であることの証明前記1.(2)によって分離されたSP細胞集団はCD31/CD45の発現パターンにより+/+,+/-,-/-の3つの分画に分けられた。免疫不全マウスへのSP細胞移植実験では、構築頻度は低いものの、SP移植部位に腺管構造を有する子宮内膜様組織の再構築が認められた。 3.幹細胞維持および分化のためのin vitro培養系の確立自己複製能と相対的な不死化能の証明のため、各種増殖因子を含んだ培養カクテルやマトリゲルを含めた細胞外基質存在下でSP細胞の長期培養系の確立を目指したがin vitroの培養は極めて困難であることが判明した。現在共培養を中心とした新しい培養システムの開発に加え、さらに様々な培養カクテルを用いてin vitro培養が可能か否かを検証中であり、これは次年度も引き続いて行う。

研究成果

(10件)

すべてその他

すべて文献書誌 (10件)

[文献書誌] Maruyama T, Yamamoto Y, Shimizu A, Masuda H, Sakai N, Sakurai R, Asada H, Yoshimura Y: "Pyrazolo pyrimidine-type inhibitors of src family tyrosine kinases promote ovarian steroid-induced differentiation of human endometrial stromal cells In Vitro."Biol Reprod.. 70(1). 214-221 (2004)
[文献書誌] Matsumoto T, Miyakoshi K, Kasai K, Ishimoto H, Tanaka M, Ikeda K, Yoshimura Y: "Fetal goitrous hypothyroidism followed by neonatal transient hypoerthyroidism."Fetal Diagn Ther.. 18. 459-462 (2003)
[文献書誌] Yoshimura Y: "Oocyte maturation in humans : the potential relevance to reproductive medicine."J Mamm Ova Res.. 20. 86-92 (2003)
[文献書誌] Kashiwagi S, Miyakoshi K, Ishimoto H, Tanaka M, Yoshimura Y: "Checkmark fetal heart rate pattern associated with severe fetal hypoxia : A case report."Fetal Diagn.Ther.. 18. 237-239 (2003)
[文献書誌] Iwahashi K, Kuji N, Fujiwara T, Tanaka H, Takahashi J, Inagaki N, Komatsu S, Yamamoto A, Voshimura Y, Akagawa K: "Expression of the exocytotic protein syntaxin in mouse oocytes."Reproduction.. 126. 73-81 (2003)
[文献書誌] Sakai N, Maruyama T, Sakurai R, Masuda H, Yamamoto Y, Shimizu A, Kishi I, Asada H, Yamagoe S, Yoshimura Y: "Involvement of histone acetylation in ovarian steroid-induced decidualization of human endometrial stromal cells."J Biol Chem.. 278(19). 16675-16682 (2003)
[文献書誌] Tei C, Maruyama T, Kuji N, Miyazaki T, Mikami M, Yoshimura Y: "Reduced expression of αvβ3 integrin in the endometrium of unexplained infertility patients with recurrent IVF-ET failures : Improvement by danazol treatment."J Assist Reprod Genet.. 20(1). 13-20 (2003)
[文献書誌] Miyakoshi K, Tanaka M, Ueno K, Uehara K, Ishimoto H, Yoshimura Y: "Cutoff value of 1 h, 50 g glucose challenge test for screening of gestational diabetes mellitus in a Japanese population."Diabetes Res Clin Pract.. 60. 63-67 (2003)
[文献書誌] Tanaka Y, Kato S, Tanaka M, Kuji N, Yoshimura Y: "Structure and expression of the human oocyte-specific histone H1 gene elucidated by direct RT-nested PCR of a single oocyte."Biochem Biophys Res Commun.. 304. 351-357 (2003)
[文献書誌] Yoshimura Y: "Insulin-like growth factors and their binding proteins : the potential relevance to reproductive physiology."Reprod Med Biol.. 2. 1-24 (2003)

2003 年度 実績報告書

雌性生殖器官における組織幹細胞システムの分子メカニズムの解明

研究代表者

吉村 泰典 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (10129736)

研究成果

[文献書誌] Maruyama T, Yamamoto Y, Shimizu A, Masuda H, Sakai N, Sakurai R, Asada H, Yoshimura Y: "Pyrazolo pyrimidine-type inhibitors of src family tyrosine kinases promote ovarian steroid-induced differentiation of human endometrial stromal cells In Vitro."Biol Reprod.. 70(1). 214-221 (2004)

[文献書誌] Matsumoto T, Miyakoshi K, Kasai K, Ishimoto H, Tanaka M, Ikeda K, Yoshimura Y: "Fetal goitrous hypothyroidism followed by neonatal transient hypoerthyroidism."Fetal Diagn Ther.. 18. 459-462 (2003)

[文献書誌] Yoshimura Y: "Oocyte maturation in humans : the potential relevance to reproductive medicine."J Mamm Ova Res.. 20. 86-92 (2003)

[文献書誌] Kashiwagi S, Miyakoshi K, Ishimoto H, Tanaka M, Yoshimura Y: "Checkmark fetal heart rate pattern associated with severe fetal hypoxia : A case report."Fetal Diagn.Ther.. 18. 237-239 (2003)

[文献書誌] Iwahashi K, Kuji N, Fujiwara T, Tanaka H, Takahashi J, Inagaki N, Komatsu S, Yamamoto A, Voshimura Y, Akagawa K: "Expression of the exocytotic protein syntaxin in mouse oocytes."Reproduction.. 126. 73-81 (2003)

[文献書誌] Sakai N, Maruyama T, Sakurai R, Masuda H, Yamamoto Y, Shimizu A, Kishi I, Asada H, Yamagoe S, Yoshimura Y: "Involvement of histone acetylation in ovarian steroid-induced decidualization of human endometrial stromal cells."J Biol Chem.. 278(19). 16675-16682 (2003)

[文献書誌] Tei C, Maruyama T, Kuji N, Miyazaki T, Mikami M, Yoshimura Y: "Reduced expression of αvβ3 integrin in the endometrium of unexplained infertility patients with recurrent IVF-ET failures : Improvement by danazol treatment."J Assist Reprod Genet.. 20(1). 13-20 (2003)

[文献書誌] Miyakoshi K, Tanaka M, Ueno K, Uehara K, Ishimoto H, Yoshimura Y: "Cutoff value of 1 h, 50 g glucose challenge test for screening of gestational diabetes mellitus in a Japanese population."Diabetes Res Clin Pract.. 60. 63-67 (2003)

[文献書誌] Tanaka Y, Kato S, Tanaka M, Kuji N, Yoshimura Y: "Structure and expression of the human oocyte-specific histone H1 gene elucidated by direct RT-nested PCR of a single oocyte."Biochem Biophys Res Commun.. 304. 351-357 (2003)

[文献書誌] Yoshimura Y: "Insulin-like growth factors and their binding proteins : the potential relevance to reproductive physiology."Reprod Med Biol.. 2. 1-24 (2003)

2003 年度実績報告書

吉村泰典慶應義塾大学, 医学部, 教授 (10129736)