|
マウス始原生殖細胞は胚発生の初期段で、多能性幹細胞の一部が前駆細胞を経て分化運命決定されることにより形成される。その過程では複数の遺伝子カスケードが働いていることが予想されるが、詳細は明らかになっていない。そこで始原生殖細胞で特異的に発現する遺伝子の発現制御を上流に遡ることにより、分化決定機構を明らかにすることを試みている。前駆細胞の時期から始原生殖細胞で特異的に発現するmil-1遺伝子の発現制御について、これまでに行ったトランスジェニックマウスを使った解析から、この遺伝子の転写開始点の上流領域、3kbpの範囲が始原生殖細胞に特異的な発現に重要であることが明らかになった。始原生殖細胞の分化過程ではDNAのメチル化状態が全ゲノム的に大きく変化することから、DNAメチル化がこの遺伝子の発現制御に係わる可能性を考えて解析を行った。Oct3/4-GFPトランスジェニックマウスからフローサイトメトリーで純化した始原生殖細胞と体細胞、およびES細胞を用いてCpG部分のメチル化を網羅的に解析できるバイサルファイト法によりメチル化状態を調べた結果、上流500bpまではいずれの細胞でもDNAは脱メチル化状態になっているが、それより上流3kbpまではmil-1を発現している始原生殖細胞では脱メチル化状態だが、発現していない体細胞では高メチル化状態で、さらにmil-1の弱い発現が見られるES細胞では中間的なメチル化状態であり、この領域のメチル化が発現制御に重要である可能性が示唆された。
|
