ライゲーションケミストリーの展開に基づく膜蛋白質合成法の開発

2008 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 15083204
• 研究種目: 特定領域研究
• 配分区分: 補助金
• 審査区分: 生物系
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 相本 三郎 大阪大学, 蛋白質研究所, 教授 (80029967)
• 研究分担者: 川上 徹 大阪大学, 蛋白質研究所, 准教授 (70273711) ; 佐藤 毅 大阪大学, 蛋白質研究所, 助教 (90403013)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2008
• キーワード: 膜蛋白質 / 化学合成 / ライゲーション法 / 補助基 / ペプチドチオエステル / 溶解性

研究概要

ライゲーションケミストリーの開発を中心課題とし、膜蛋白質の合成法に関する総合的研究を行った。また、本研究の過程で得られた知見を元に、膜貫通ドメインを有するペプチドや蛋白質の合成を行い、FGFR3、ErbB2/Neuなどの受容体型チロシンキナーゼや、アミロイド前駆体蛋白質の膜貫通部位の構造解析を行った。また、四回膜貫通型蛋白質の化学合成に世界で始めて成功した。

研究成果

• [雑誌論文] The use of a cysteinyl prolyl ester (CPE) autoactivating unit in peptide ligation reactions (2009)
  • 著者名/発表者名: T. Kawakami, S. Aimoto
  • 雑誌名: Tetrahedron 65 ページ: 3871-3877
  • 査読あり
• [雑誌論文] Peptide purification by affinity chromatography based on α-ketoacyl group chemistry (2009)
  • 著者名/発表者名: T. Hara, A. Tainosho, K. Nakamura, T. Sato, T. Kawakami, S. Aimoto
  • 雑誌名: J. Peptide Sci. 15 ページ: 369-376
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structure of the transmembrane dimer of the amyloid precursor protein: Implications for proteolysis by g-secretase (2009)
  • 著者名/発表者名: T. Sato, T.-C.Tang, G. Reubins, J.Z. Fei, T. Fujimoto, P. Kienlen-Campard, S. N. Constantinescu, J.-N. Octave, S. Aimoto, S. O. Smith
  • 雑誌名: Proc. Natl Acad. Sci. USA 106 ページ: 1421-1426
  • 査読あり
• [雑誌論文] Peptide Ligation Using the Cysteinyl Prolyl Ester (CPE) Activating Unit at the Carboxy Terminus (2007)
  • 著者名/発表者名: T. Kawakami, S. Aimoto
  • 雑誌名: Chem. Lett. 36 ページ: 76-77
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of an S-Peptide via an N-S Acyl Shift Reaction in TFA Solution (2006)
  • 著者名/発表者名: K. Nakamura, M. Sumida, T. Kawakami, T. Vorherr, S. Aimoto
  • 雑誌名: Bull Chem Soc. Jpn. 79 ページ: 1773-1780
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibitors of amyloid toxicity based on beta-sheet packing of Aβ40 and Aβ42. (2006)
  • 著者名/発表者名: T. Sato, P. Kienlen-Campard, M. Ahmed, W. Liu, H. Li, J. I. Elliott, S. Aimoto, S. N. Constantinescu, J. N. Octave, S. O. Smith
  • 雑誌名: Biochemistry 45 ページ: 5503-16
  • 査読あり
• [雑誌論文] Peptide Thioester Preparation Based on an N-S Acyl Shift Reaction Mediated by a Thiol Ligation Auxiliary. (2005)
  • 著者名/発表者名: T. Kawakami,M. Sumida, K. Nakamura, T. Vorherr, S. Aimoto
  • 雑誌名: Tetrahedron Lett. 46 ページ: 8805-8807
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synthesis of the C-terminal Region of Opioid Receptor Like 1 in an SDS Micelle by the Native Chemical Ligation: Effect of Thiol Additive and SDS Concentration on Ligation Efficiency, (2005)
  • 著者名/発表者名: T. Sato, Y. Saito, S. Aimoto
  • 雑誌名: J. Peptide Sci. 11 ページ: 410-416
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sequential Peptide Chemical Ligation by the Thioester Method and Extended Chemical Ligation. (2005)
  • 著者名/発表者名: T. Kawakami, M. Tsuchiya, K. Nakamura, S. Aimoto
  • 雑誌名: Tetrahedron Lett. 46 ページ: 5533-5536
  • 査読あり
• [学会発表] ネイティブケミカルライゲーション法とチオエステル法の併用を可能にするチオール保護基としてのメチルチオ基の利用 (2008)
  • 著者名/発表者名: 赤井優一
  • 学会等名: 第45回ペプチド討論会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2008-10-30
• [学会発表] 電位依存性プロトンチャネル(VSOP)(121-222)の合成 (2008)
  • 著者名/発表者名: 中村健一郎
  • 学会等名: 第45回ペプチド討論会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2008-10-30
• [学会発表] アミノオキシ基とイソチオシアネート基の選択的化学反応とそれに続くエドマン分解を利用したペプチドの精製 (2008)
  • 著者名/発表者名: 田結荘明
  • 学会等名: 第45回ペプチド討論会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2008-10-29
• [学会発表] Peptide thioester preparation and peptide ligation using cysteinyl prolyl ester (CPE) autoactivating unit (2008)
  • 著者名/発表者名: Toru Kawakami
  • 学会等名: 30th European Peptide Symposium
  • 発表場所: ヘルシンキ
  • 年月日: 2008-09-01
• [学会発表] α-ケトアシル基の形成と切断を鍵反応とするペプチド精製法の開発 (2008)
  • 著者名/発表者名: 原利明
  • 学会等名: 日本化学会第88春季年会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2008-03-27
• [備考] ホームページ
  • URL: http://www.protein.osaka-u.ac.jp/organic/index.html
• [産業財産権] ペプチドエステル試薬,およびそのライゲーションまたチオエステル化合物の製造のための使用 (2006)
  • 発明者名: 相本三郎、川上徹
  • 権利者名: 相本三郎、川上徹、大阪大学、大阪産業振興機構
  • 産業財産権番号: 特許願, PCT/JP2006/320392
  • 出願年月日: 20061000
  • 外国
• [産業財産権] ペプチドエステルを用いたライゲーション法、およびチオエステル化合物の製造方法 (2005)
  • 発明者名: 川上徹、相本三郎
  • 権利者名: 川上徹、相本三郎、大阪大学、大阪産業振興機構
  • 産業財産権番号: 特許願, 特願2005-30000947
  • 出願年月日: 20051000