二段階二層法を用いた心停止ドナーからの臨床膵島移植

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15209043
• 研究種目: 基盤研究(A)
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 黒田 嘉和 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (70178143)
• 研究分担者: 谷岡 康喜 神戸大学, 大学院・医学系研究科, COE研究員 ; 藤野 泰宏 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (30335450) ; 鈴木 康之 神戸大学, 医学部附属病院, 講師 (40304092) ; 谷口 洋 神戸大学, 医学部, 教授 (70030989) ; 横野 浩一 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (50144580)
• キーワード: 膵島移植 / 心停止ドナー / 温阻血障害 / 二層法 / 膵島培養

研究概要

昨年9月12日、千葉で1例目の脳死ドナーからの膵臓摘出、膵島分離が行われた。当施設からも摘出メンバーを派遣し、搬送中には二層法保存を行った。その後、国内では現在までに3例の心停止ドナーからの膵臓摘出、膵島分離が行われ、4例目以外の膵臓保存には二層法が使用された。膵島分離成績は1例目:収量177,800IEQ、純度30%、Stimulation index (SI)1.53、2例目:収量183,066IEQ、純度70%、Stimulation index (SI)8.6、3例目:収量60,120IEQ、純度60%、Stimulation index (SI)4.2
Preclinicalな研究として、膵島分離前の膵臓の二層法保存が分離膵島のapoptosis抑制に有効であることを証明した。(Surgery 134(3),437-445,2003)
また、現在行っている実験として、心停止ドナーを想定した30分から60分までのRat温阻血障害膵モデルを作成し、3時間の二層法保存後に膵島分離を行うと、30分温阻血では二層法保存を行わなかった群より有意に膵島収量が増加した。加えて、保存後の膵臓内ATPの上昇も見られた。今後はin vivoでの膵島機能評価を行う予定である。
分離膵島の二層法(24℃ RPMI/PFC、および4℃ UW/PFC)を用いた培養では、培養後のStimulation indexで好成績が得られたが、24℃ RPMI単独培養群に比べ有意差は認められ、なかった。現在、in vivoでの膵島機能評価を行い、二層法を用いた培養の効果に関して検討中である。

研究成果

• [文献書誌] Matsuda T, Suzuki Y, Tanioka Y, Toyama H, Kakinoki K, Hiraoka K, Fujino Y, Matsumoto S, Kuroda Y: "Pancreas preservation by the two-layer cold storage method before islet isolation protects isolated islets against apoptosis through the mitochondrial pathway"Surgery. 134・3. 437-445 (2003)
• [文献書誌] Toyama H, Takada M, Suzuki Y, Kuroda Y.: "Brain death induced expression of ICAM-1 and VCAM-1 on rat hepatocytes."Hepato-Gastroenterol. 50. 1854-1856 (2003)
• [文献書誌] Takada M, Toyama H, Tanaka T, Suzuki Y, Kuroda Y.: "Augmentation of interleukin-10 expression in islets after brain death"Transplant Proc. (in press).
• [文献書誌] Tsujimura T, Kuroda Y, Shapiro AMJ: "The influence of pancreas preservation on human islet isolation outcomes : Impact of the two-layer method"Transplantation. (in press).
• [文献書誌] Tsujimura T, Kuroda Y, Lakey JRT: "Short-term storage of the ischemically damaged human pancreas by the two-layer method prior to islet isolation"Cell Transplant. (in press).