| 研究課題/領域番号 |
15209058
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
檜山 英三 広島大学, 自然科学研究支援開発センター, 教授 (00218744)
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| 研究分担者 |
高橋 規郎 放射線影響研究所, 遺伝学部, 室長(研究職) (40333546)
檜山 桂子 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 助教授 (60253069)
京 哲 金沢大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (50272969)
山岡 裕明 広島大学, 病院・助手 (90311810)
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| キーワード | 神経芽細胞腫 / マイクロアレイ / CGHアレイ / 悪性度 / カスパーゼ / メチレーション / リスク分類 / オーダーメイド治療 |
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| 研究概要 |
予後の明らかな322例の神経芽細胞腫を対象に検討した。アレイCGH解析では、MYCN領域の増幅や1p欠失に加え、3・4・11・14・17番染色体にも変化を認め、11qの部分欠失は予後木良で、独立の特性を示した。正常胎児悩cDNA libraryから作成したcDNAアレイ、全ゲノムのオリゴアレイ及びマイクロソートによる解析で抽出した182遺伝子にて簡易アレイを作製し、遺伝子発現を解析すると、予後不良例が95%の確率で層別化できた。また、hTERT、Caspase 8,9のプロモーターのCpG領域のメチル化を識別する簡易アレイ検索では、Caspase 8の2箇所のメチル化が予後と有意に相関し、hTERT及びCaspase 9は各々6、5箇所に変動が見られたが、予後と相関はなかった。腫瘍内にheterogeneityのある9例、生検後化学療法し摘出した30例、多発11例,再発例8例で、腫瘍部位をマイクロダイセクションし、初回摘出巣と比較したところ、遺伝子異常が加わった12例は全て予後不良であったが、多発例、再発例でDNA量の差があっても、遺伝子量が均等に増減した症例(3n、4nから2n)は予後良好で、分化との関連が示唆された。神経芽腫細胞株12株に、テロメラーゼ阻害剤GRN163やhTERTに対するsiRNAを投与で、5株に活性抑制と細胞死、増殖抑制がみられ、発現解析では細胞増殖シグナル低下とアポトーシス関連遺伝子の発現上昇を認めた。また、レチノイドにて分化誘導する3株ではMYCN発現の低下とテロメラーゼ活性の消失、アポトーシスと神経分化の関連遺伝子の発現上昇が見られた。
以上から、神経芽細胞腫の腫瘍特性は、簡易cDNAアレイとCGHアレイにて把握可能となった。また、治療への反応性、分化誘導療法の適応などの判別も可能となることが期待され、有用なツールと考えられた。
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