研究課題
基盤研究(A)
神経芽細胞腫検体のうち予後が明らかな322例を対象に検討した。アレイCGH解析では、MYCN増幅や1・3・4・11・14・17番染色体に変化を認め、これらで簡易アレイCGHを作製し検討した結果11qの部分欠失は独立した予後不良因子であった。胎児脳cDNA library由来cDNAアレイ、全ゲノムのオリゴアレイ及びマイクロソート解析で抽出した182遺伝子を対象に、発現解析簡易アレイを作製し解析すると、予後不良例が95%の確率で層別化できた。また、また、hTERTおよびCaspase 8,9のプロモーターのCpG領域のメチル化を識別する簡易アレイを作製し120例で検討したところ、Caspase 8の2箇所のメチル化が予後と有意に相関し、hTERT及びCaspase 9は各々6、5箇所に変動が見られたが、予後と相関はなかった。腫瘍内にheterogeneityのある9例、化学療法後摘出の30例、多発11例,再発例8例、退縮,分化が確認された6例中で、腫瘍部位をマイクロダイセクションし、初回原発巣と比較したところ、遺伝子異常が加わった12例は全て予後不良であったが、多発例、再発例、分化・退縮例は遺伝子変化やメチル化の変動はなく予後良好であった。神経芽腫細胞株12株に、テロメラーゼ阻害剤GRN163やhTERTに対するsiRNAを投与で、5株、7株に活性抑制と細胞死、増殖抑制がみられ、細胞増殖シグナルの発現低下とアポトーシス関連遺伝子の発現上昇を認めた。また、レチノイドにて分化誘導する3株ではMYCN発現の低下とテロメラーゼ活性の消失、アポトーシスと神経分化の関連遺伝子の発現上昇が見られた。以上から、神経芽細胞腫の腫瘍特性は、簡易発現解析アレイとCGHアレイにて把握可能となった。また、治療への反応性、分化誘導療法の適応などの判別も可能で、有用なツールと考えられた。
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