2003 年度実績報告書

JCウイルスAgnoに対するRNAiを用いた進行性多巣性白質脳症の治療法の開発

研究課題

研究課題/領域番号	15300112
研究種目	基盤研究(B)
研究機関	北海道大学
研究代表者	澤洋文北海道大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (30292006)
研究分担者	本山昇国立長寿医療センター, 研究所・老年病研究部, 室長 (50277282) 高橋秀宗国立感染症研究所, 感染病理部, 室長 (70260271)
キーワード	JC virus / agnoprotein / siRNA / 感染抑制
研究概要	平成15年度の研究計画に沿って以下の研究を行なった。 JCウイルスの後期遺伝子であるAgnoに対するRNAiの検討。216塩基から成るAgno遺伝子に対して、最大の発現抑制効果を示すRNAiの配列およびRNAiの導入法の検討を行った。 JCウイルス(JCV)感染許容細胞であるヒト膠細胞由来のSVG細胞にJCVを感染させた後にAgnoに対するRNAiを細胞に導入し、Agnoの発現が抑制されている事を確認した。Agno蛋白の発現は申請者等が作成した特異抗体を用いたimmunoblot法、免疫染色法で検討を行った。また定量的RT-PCR法によりmRNAの発現を検討した。RNAiの導入方法としては現在汎用されている細胞導入用試薬を比較検討した。これらの導入法の評価はFITC蛍光色素を標識したRNAiを導入し、導入効率を共焦点レーザー蛍光顕微鏡システムを用いて検討した。その結果、Agnoに対するsiRNAの2種類(Ag122,Ag147)を用いた場合、JCVの蛋白、mRNAの発現抑制を生じることをimmunoblotting法、免疫染色法、定量的RT-PCR法を用いて確認した。さらにJCV感染後の赤血球凝集効果を測定し、JCV感染自体が抑制される事も確認した。この結果に関しては特許をsiRNAの配列に関して特許を2件出願し、また論文としてJournal of Virologyに投稿して、現在再評価の段階である。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Shoya Y, Tokunaga T, Sawa H. et al.: "Human topoisomerase I promotes HIV-1 proviral DNA synthesis"Proc Natl Acad Sci USA. 100. 8442-8447 (2003)
[文献書誌] Ogita H, Kunimoto S, Kamioka K, Sawa H, et al.: "EphA4-mediated Rho activation via Vsm-RhoGEF expressed specifically in vascular smooth muscle cells"Circ Res. 93. 23-31 (2003)
[文献書誌] Watanabe I, Ross TM, Tamura Si, Ichinohe T, Ito S, Takahashi H, Sawa H, et al.: "Protection against influenza virus infection by intranasal administration of C3d-fused hemagglutinin"Vaccine. 21. 4532-4538 (2003)
[文献書誌] Ohnishi A, Sawa H, et al.: "Expression of the oligodendroglial lineage-associated markers Olig1 and Olig2 in different types of human gliomas"J Neuropathol Exp Neurol. 62. 1052-1059 (2003)
[文献書誌] Ricciardiello L, Baglioni M, Giovannini C, Pariali M, Cenacchi G, Ripalti A, Landini MP, Sawa H, et al.: "Induction of Chromosomal Instability in Colonic Cells by the Human Polyomavirus JC Virus"Cancer Res. 63. 7256-7262 (2003)
[文献書誌] Teramoto T, Kaneko H, Futano M, Sawa H, et al.: "Progressive multifocal leukoencephalopathy in a patient with X-linked agammaglobulinemia"Scand J Infect Dis. 35. 910-911 (2003)

2003 年度 実績報告書

JCウイルスAgnoに対するRNAiを用いた進行性多巣性白質脳症の治療法の開発

研究代表者

澤 洋文 北海道大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (30292006)

研究成果

[文献書誌] Shoya Y, Tokunaga T, Sawa H. et al.: "Human topoisomerase I promotes HIV-1 proviral DNA synthesis"Proc Natl Acad Sci USA. 100. 8442-8447 (2003)

[文献書誌] Ogita H, Kunimoto S, Kamioka K, Sawa H, et al.: "EphA4-mediated Rho activation via Vsm-RhoGEF expressed specifically in vascular smooth muscle cells"Circ Res. 93. 23-31 (2003)

[文献書誌] Watanabe I, Ross TM, Tamura Si, Ichinohe T, Ito S, Takahashi H, Sawa H, et al.: "Protection against influenza virus infection by intranasal administration of C3d-fused hemagglutinin"Vaccine. 21. 4532-4538 (2003)

[文献書誌] Ohnishi A, Sawa H, et al.: "Expression of the oligodendroglial lineage-associated markers Olig1 and Olig2 in different types of human gliomas"J Neuropathol Exp Neurol. 62. 1052-1059 (2003)

[文献書誌] Ricciardiello L, Baglioni M, Giovannini C, Pariali M, Cenacchi G, Ripalti A, Landini MP, Sawa H, et al.: "Induction of Chromosomal Instability in Colonic Cells by the Human Polyomavirus JC Virus"Cancer Res. 63. 7256-7262 (2003)

[文献書誌] Teramoto T, Kaneko H, Futano M, Sawa H, et al.: "Progressive multifocal leukoencephalopathy in a patient with X-linked agammaglobulinemia"Scand J Infect Dis. 35. 910-911 (2003)

2003 年度実績報告書

澤洋文北海道大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (30292006)