研究課題
基盤研究(B)
成体肝臓中に存在する幹細胞の候補の一つとして肝上皮細胞が挙げられている。我々はこれまでに健常SDラット肝臓の非実質分画中に存在する、α-フェトプロテイン陽性、アルブミン/サイトケラチン19陰性を示す未分化な上皮細胞(HSL細胞)を樹立し、その分化能を検討した。HSL細胞は培養条件を変えることによって成熟肝細胞あるいは胆管上皮細胞へ分化誘導できることを明らかにした。HSL細胞を肝星細胞と共培養したり、I型コラーゲンゲル内で三次元培養したりすると、成熟肝細胞のマーカー蛋白質を発現するようになった。以上のように、様々な条件下でHSL細胞を培養すると成熟肝細胞あるいは胆管上皮細胞の形質を示すようになったことから、HSL細胞は二方向性の分化能を保持していることが明らかになった。このことは、HSL細胞が成体肝に存在する幹細胞として機能できることを示唆しているものと考えられる。次に、肝臓幹様細胞(HSL細胞)を用いた効率移植方法を検討するため、肝臓の主要な細胞外マトリクス成分であるI型コラーゲンによって作製された各種移植担体を用いた細胞移植を行った。移植6週後、コラーゲンスポンジ内にアルブミンを発現している細胞が免疫染色によって確認された。さらに無アルブミンラット血清中のアルブミン量が移植後11週目から増加していることを認めた。移植担体間での比較では、ゲル状コラーゲンを用いた群では移植前に比べて2.5倍量の増加を認めたのに対し、スポンジ状コラーゲンを用いた群では1.7倍の増加であった。以上より、ゲル状コラーゲンを用いた移植方法がHSL細胞の生着や機能発現に効果的であることが分かった。また、正常な成体肝臓から得られたHSL細胞は、in vitroで膵臓の内分泌腺細胞に分化する能力性を持っていた。HSL細胞はインシュリン依存性糖尿病のための細胞移植療法のためのβ細胞源の一つとなる可能性がある。
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