環境中の化学物質のゲノムレベルへの影響評価

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15310043
• 研究機関: 岡崎国立共同研究機構
• 研究代表者: 渡邉 肇 岡崎国立共同研究機構, 統合バイオサイエンスセンター, 助教授 (80212322)
• 研究分担者: 井口 泰泉 岡崎国立共同研究機構, 統合バイオサイエンスセンター, 教授 (90128588)
• キーワード: ホルモン / 化学物質影響 / エストロゲン / マウス / 免疫沈降

研究概要

環境中の化学物質は、様々な局面でヒトを含めた生物に影響を及ぼしていることが明らかになってきている。そうした中で、ホルモン様活性を有する化学物質の影響が問題視されて久しいが、実際にどの程度、生理的なホルモン影響を模倣しているのかについては、いまだ明確になっていない。そうした中で、生理的なステロイドホルモンは、核内受容体に結合してホルモン-核内受容体複合体がゲノムDNAに結合することが知られている。
本研究では、ゲノムレベルでの化学物質影響を明らかにすることを目的として、化学物質-核内受容体複合体がホルモン-核内受容体複合体と同様にゲノムDNAに結合しうるのかについて解析を行った。
ホルモン作用を有すると考えられる化学物質について、ゲノムレベルでの影響を明らかにするために、クロマチン免疫沈降法を用いた解析を行った。
まず生理的なホルモンである女性ホルモン(エストロゲン)を用い、実験系の構築を行った。マウスにエストロゲンを投与して、一定時間後に子宮を摘出し複合体を架橋した後に、抗エストロゲン受容体抗体を用いる事により、エストロゲン受容体-DNA複合体を回収した。回収した複合体の架橋を切断し遊離したDNAを増幅する事により、エストロゲン受容体が直接に結合しているゲノム断片の同定を行うことができた。現在、この情報をもとに、化学物質-核内受容体複合体が結合するゲノムDNA配列に関する解析も進めている。

研究成果

• [文献書誌] Miyagawa et al.: "Estrogen-Independent Activation of ErbBs Signaling and Estrogen Receptor in the Mouse Vagina Exposed Neonataly to Diethylstilbesterol."Oncogene. 23. 340-349 (2003)
• [文献書誌] Watanabe et al.: "Similarity and differences in uterine gene expression patterns caused by treatment with physiological and non-physiological estrogens"Journal of Molecular Endocrinology. 31. 487-497 (2003)
• [文献書誌] Watanabe et al.: "Analysis of temporal changes in the expression of estrogen regulated genes in the uterus."Journal of Molecular Endocrinology. 30. 347-358 (2003)
• [文献書誌] Nishi et al.: "Spatial redox regulation of a critical cysteine residue of NF-kappa B in vivo."Journal of Biological Chemistry. 277. 44548-44556 (2003)
• [文献書誌] Sawa et al.: "YEAF1/RYBP and YAF-2 are functionally distinct members of a cofactor family for the YY1 and E4TF1/hGABP transcription factors."Journal of Biological Chemistry. 277. 22484-22490 (2003)
• [文献書誌] Kanesashi et al.: "Simian virus 40 VP1 capsid protein forms polymorphic assemblies in vitro."Journal of General Virology. 84. 1899-1905 (2003)
• [文献書誌] 井上 達 ほか: "高次生命系と内分泌撹乱化学物質"シュプリンガー・フェアラーク(印刷中).