多細胞動物の成立におけるチロシンキナーゼの役割に関する研究

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15370056
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 岡田 雅人 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (10177058)
• キーワード: チロシンキナーゼ / 多細胞動物 / 海綿動物 / Src / 線虫 / 卵巣 / Csk

研究概要

チロシン残基に特異的なリン酸化酵素チロシンキナーゼは多細胞動物に特異的に存在すると考えられている。本研究では、その多細胞動物成立における本質的な役割を理解するために、代表的な細胞質型チロシンキナーゼであるSrc型チロシンキナーゼ(SFK)について以下の研究を行った。
1.最も原始的な多細胞物である海綿動物におけるSFKの役割解析:海綿動物のSFKを5種類、SFKの必須の制御因子であるCskを一種類クローニングし、それらの機能と高等動物の機能を比較した。動物細胞にそれぞれのクローンを発現させて活性を確認した結果、いずれのSFKも強いチロシンキナーゼ活性を有すること、高等動物のSFKと同様にCskによるC末端近くのチロシン残基のリン酸化によって活性が調節されること、海綿SFKおよびCskが高等動物のそれらの機能を相補できることなどが明らかとなり、多細胞動物が成立した段階ですでにSFKの機能が確立し、それが長い進化の過程で良く保存されていることが明らかとなった。現在、海綿動物におけるSFKの機能解析の準備を進めている。2.遺伝学的な解析が最も進んでいる線虫におけるSFKの役割解析:線虫のSFXとしてSRC-1とKIN22、CskとしてCSK-1を同定し、まず酵母細胞でそれらの活性と調節機構を解明した。線虫におけるそれらの役割を明らかにするために、RNAiやdeletion mutantを用いた解析を行った。その結果、SRC-1の機能を抑制すると、卵巣の形成に大きな異常が生じることを見いだした。またその異常が、卵巣形成の先導役を担うDistal Tip細胞にSRC-1を発現することレスキューできることから、SRC-1がDistal Tip細胞の運動性の制御に重要な役割を担っていることが明らかとなった。現在、SRC-1の上流下流の因子を同定して、それらの作用機序を明らかにしようとしている。

研究成果

• [文献書誌] Rengifo-Cam W.: "Csk defines the ability of integrin-mediated cell adhesion and migration in human colon cancer cells-implication for a potential role in cancer metastasis"Oncogene. 23. 289-297 (2004)
• [文献書誌] Matsuoka H.: "Mechanism of Csk-mediated down regulation of Src family tyrosine kinases in EGF signaling"J.Biol.Chem.. 279(7). 5975-5983 (2004)
• [文献書誌] Shima T.: "Transmembrane Phosphoprotein Cbp senses cell adhesion signaling mediated by the Src family kinase in lipid rafts"PNAS.. 100(25). 14897-14902 (2003)
• [文献書誌] Nada S.: "Identification of PSD-93 as substrate for the Src family tyrosine kinase Fyn"J.Biol.Chem.. 278(48). 47610-47621 (2003)
• [文献書誌] Gu J.: "Csk regulates integrin-mediated signals : involvement of differential activation of ERK and Akt"Biochem Biophys Res Commun.. 303. 973-977 (2003)
• [文献書誌] Hirose T.: "Hirose T, Koga M, Ohshima Y, Okada M. Distinct roles of the Src family kinases, SRC-1 and KIN-22, that are negatively regulated by CSK-1 in C.elegans"FEBS Lett.. 534. 133-138 (2003)