脂肪前駆細胞分化誘導調節物質の探索研究

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15380085
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 生方 信 北海道大学, 大学院・農学研究科, 教授 (60168739)
• 研究分担者: 松浦 信康 富山県立大学, 工学部, 助手 (60281250)
• キーワード: 3T3-L1細胞 / セスキテルペノイド化合物 / 分化誘導阻害 / ミコフェノール酸 / プロアントシアニジン

研究概要

マウス前駆脂肪細胞(3T3-L1細胞)のインスリン添加による脂肪細胞への分化誘導阻害活性を有する物質の構造と機能を明らかにする目的で以下の研究を行った。
我々は、マウス脂肪前駆細胞3T3-L1のインスリンによる脂肪細胞への分化を阻害する物質の探索研究を行い、キク科植物Calea urticiforiaの抽出液に顕著な活性を見出した。活性を指標に単離精製を行い、単離された化合物は新規化合物4種を含む7種のセスキテルペノイド化合物であることが判った。類似の構造を持つが脂肪細胞への分化誘導阻害活性を持たないパルテノライドと比較して、これらの化合物の構造と活性の関係を明らかにした。その結果、側鎖のαβ不飽和エステルが活性に関与し、パルテノライドと比較して、様々な蛋白質やシステインとの非特異的な結合は少なかった。レポータアッセイの結果PPARγの発現を阻害しないことも明らかになった。これらの化合物は脂肪細の分化の初期におけるステージ特異的に発現する脂肪細胞の分化に必須な因子を阻害することにより、3T3-L1細胞の脂肪細胞への分化を抑制することを示唆するデータを得た。さらに、糸状菌の培養液から活性物質として、それぞれμMオーダー並びにnMオーダーで脂肪細胞の分化を阻害するテレイン及びミコフェノール酸を見出している。なかでも、ミコフェノール酸の多様な生物活性はIMPデヒドロゲナーゼを阻害することで、その作用を発現すると信じられてきたが、我々は本化合物の脂肪細胞分化誘導阻害活性は、転写レベルで制御されているPPAR-γの阻害を経て発現されるという実験事実を積み上げつつある。また、立体選択的な方法論が欠如していたプロアントシアニジン類の系統的な合成に成功した。

研究成果

• [文献書誌] S.Mitsuhashi: "Usage of tautomycin, a novel inhibitor of protein phosphatase 1 (PP1), reveals that PP1 is a positive regulator of"J.Biol.Chem.. 278. 82-88 (2003)
• [文献書誌] I.Iliya: "Six flavonostilbenes from Gnetum africanum and Gnetum gnemon"Heterocycles. 60. 159-166 (2003)
• [文献書誌] I.Iliya: "Three new trimeric stilbenes from Gnetum gnemon"Chem.Parm.Bull. 51. 85-88 (2003)
• [文献書誌] A.Saito: "Synthetic studies of proanthocyanidins. Part 3 : Stereoselecttive 3,4-cis catechin and catechin condensation by TMSOTf-catalyzed intramolecular coupling method"Tetrahedron Lett. 44. 5449-5452 (2003)
• [文献書誌] T.Nakanishi: "New luteolin 3' -O-acylated phmnosides from leaves of Bursera graveolens"Heterocyles. 60. 2077-2083 (2003)
• [文献書誌] M.Togashi: "Ascochlorin derivatives as ligands for nuclear hormone receptors"J.Med.Chem.. 46. 4113-4123 (2003)
• [文献書誌] N.Nakajimka: "Synthesis and activity of pyrimidinylpropenamide antibiotics : The alkyl analogues of sparsomycin"Bioscience, Biotechnology and Biochemistry. 67. 2556-2566 (2003)