胃・腸特異的カルパインの機能解析

2004 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15380089
• 研究機関: (財)東京都医学研究機構
• 研究代表者: 反町 洋之 財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 副参事研究員 (10211327)
• キーワード: カルパイン / カルシウム / 胃腸 / β-COP / DNAマイクロアレイ解析 / ノックインマウス / 胃潰瘍 / スプライスバリアント

研究概要

カルパインは細胞質内に存在し、Ca^<2+>により活性を制御されるプロテアーゼである。細胞骨格系タンパク質、情報伝達系酵素・転写因子などに直接作用し、これらの活性・構造を変換・制御するモジュレータープロテアーゼである。哺乳類細胞では14種類の遺伝子が同定され、中でも組織特異的に発現が見られるカルパインがいくつか発見されており、その組織の機能との関連で、生理機能に大きな興味が持たれている。我々が発見したnCL-2/-2'やnCL-4は、胃や腸に発現が限定されるのみならず、興味深い構造をもつ選択的スプライス産物が同時に発現している。最近、nCL-2/-2'が胃の上皮層ピット細胞に極めて限定的に局在することを見出し、細胞移動や粘液分泌に重大な機能を果たすことが強く示唆された。胃や腸は食品の消毒、免疫、あるいは消化という様々な点で非常に重要であり、それ故に胃酸や粘液の分泌など極めて特殊化した機能を有する。そこで本研究は、遺伝子改変マウスとDNAチップテクノロジーを用いて、胃・腸特異的カルパインの生理機能を解明することを目的とした。ヒト疾患の症例などの記述の一切無いnCL-2/-2'及びnCL-4に関しては、遺伝子改変マウスを作成し、その表現型を見ることが、その生理機能解析において極めて重要と考えられるため、本年度は、ホモマウスの作出を完了しているnCL-2/-2'のC105Sノックインマウスについて、主に胃・腸の形態学的・機能的解析をおこなった。さらに、nCL-2の作用機序を明確にするため、マイクロアレイ解析、ツーハイブリッドスクリーニングなどを行った結果、小胞体の逆輸送に関与すると考えられるβ-COPと相互作用することが見出された。今後はこの生理的意義を明確にしていきたい。

研究成果

• [雑誌論文] Inhibitory NK receptor Ly49Q is expressed on subsets of dendritic cells in a cellular maturation- and cytokine stimulation-dependent manner. (2005)
  • 著者名/発表者名: Toyama-Sorimachi, N., Omatsu, Y., Onoda, A., Tsujimura, Y., Iyoda, T., Maki, A., Sorimachi, H., Dohi, T., Taki, S., Inaba, K., Karasuyama, H.
  • 雑誌名: J.Immun. (in press)
• [雑誌論文] Possible regulation of the conventional calpain system by skeletal muscle-specific calpain, p94/calpain 3. (2004)
  • 著者名/発表者名: Ono, Y., Kakinuma, K., Torii, F., Irie, A., Nakagawa, K., Labeit, S., Abe, K., Suzuki, K., Sorimachi, H.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 279 ページ: 2761-2771
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Calpain. (2004)
  • 著者名/発表者名: Sorimachi, H., Ono, Y.
  • 雑誌名: Encyclopedia of Biological Chemistry (eds., W.J.Lennarz and M.D.Lane)(Elsevier, Oxford) 1 ページ: 300-306
• [雑誌論文] Degradation of fodrin by m-calpain in fibroblasts adhering to fibrillar collagen I gel. (2004)
  • 著者名/発表者名: Sato, K., Hattori, S., Irie, S., Sorimachi, H., Inomata, M., Kawashima, S.
  • 雑誌名: J.Biochem. 136 ページ: 777-785
• [雑誌論文] Neoculin as a New Taste-modifying Protein Occurring in the Fruit of Curculigo latifolia. (2004)
  • 著者名/発表者名: Shirasuka, Y., Nakajima, K., Asakura, T., Yamashita, H., Yamamoto, A., Hata, S., Nagata, S., Abo, M., Sorimachi, H., Abe, K.
  • 雑誌名: Biosce.Biotechnol.Biochem. 68 ページ: 1403-1407
• [雑誌論文] Induction and myofibrillar targeting of CARP, and suppression of the Nkx2.5 pathway in the MDM mouse with impaired titin-based signaling. (2004)
  • 著者名/発表者名: Witt, C.C.^*, Ono, Y.^*, Puschmann, E., McNabb, M., Wu, Y., Gotthardt, M., Witt, S.H., Haak, M., Labeit, D., Gregorio, C.C., Sorimachi, H., Granzier, H., Labeit, S.
  • 雑誌名: J.Mol.Biol. 336 ページ: 145-154