魚類の腫瘍壊死因子(TNF)の構造と機能に関する研究

2005 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 15380136
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 水産学一般
• 研究機関: 日本大学
• 研究代表者: 中西 照幸 日本大学, 生物資源科学部, 教授 (00322496)
• 研究分担者: 杣 源一郎 徳島文理大学, 健康科学研究所, 教授 (00158990) ; 吉浦 康寿 養殖研究所, 病害防除部, 研究員 (90372052)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2005
• キーワード: ニジマス / ゼブラフィッシュ / アユ / ドチザメ / TNFα / トランスジェニック / mRNA発現 / 組み換えTNF

研究概要

1.魚類TNF様遺伝子の構造および発現解析
アユより1種類、ニジマス及びゼブラフィッシュより2種類のTNFα遺伝子を単離し、哺乳類TNFαと同様な構造および発現を示すことを明らかにした。また、ドチザメよりTNFレセプターデコイ3(DcR3)遺伝子を単離し、ヒトと同様な遺伝子構造を有するがヒトの胎児期における発現動態を示すことを明らかにした。
2.TNF組み換えタンパクの作製及び機能解析
大腸菌を用いて低温誘導により可溶性のアユ組換えTNFの作製に成功し、精製アユTNFは頭腎白血球の活性酸素産生を誘導することが判った。
3.感染・発病に伴うTNFの発現解析
ニジマスやアユにおいてLPSの投与によりTNFの発現が誘導されること、アイソタイプ間で発現に差が認められ、2種類のTNFが感染防御において異なった役割を担うことが示唆された。ニジマスTNF1及びTNF2のプロモーター下流にGFP遺伝子を組み込んだトランスジェニック(TG)ニジマスを10系統以上確立した。これらのTGニジマスの腎臓白血球を用いて病原体に対する包囲化試験を行ったところ、TNF産生細胞が包囲化に関与していることが示唆された。
4.個体発生に伴うTNF mRNAの発現解析
ゼブラフィッシュ胚におけるTNF1及びTNF2の発現動態を調べた結果、2種類のTNFとも胚発生の初期に母性由来のRNAとして認められた。IL-1β、IFNγなどの他のサイトカインと同様に発生の進行に伴って脳、神経系で弱い発現が認められたが、MIFを除いて明瞭な局所発現は認められなかった。また、アユについて発育段階毎のTNF mRNAの発現を解析したところ、発生に伴いTNFの誘導が起こり孵化時には低下する一過性の発現が認められた。以上のことから、魚類のTNFは発生の初期において形態形成に関与していることが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] TNF induces the growth of thymocytes in rainbow trout (2006)
  • 著者名/発表者名: Hino, K, O.Nakamura, Y.Yoshiura, H.Suetake, Y.Suzuki, T.Watanabe
  • 雑誌名: Dev. Comp. Immunol. 30 ページ: 639-647
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Inherent potential for production of tumor necrosis factor-a by human intestinal macrophages (2006)
  • 著者名/発表者名: Nakata, K., H.Inagawa, T.Nishizawa, T.Honda, C.Kohchi,.G-I.Soma, et al.
  • 雑誌名: Int J Colorectal Dis. 21 ページ: 339-347
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Cloning and characterization of a LPS-regulatory gene having an LPS binding domain in kuruma prawn Marsupenaeus Japonicus. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nagoshi, H., H.Inagawa, K.Morii, H.Harada, C.Kohchi, G-I.Soma, et al.
  • 雑誌名: Molecular Immunology 43 ページ: 2061-2069
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Cloning and characterization of a TNF-like protein of Plecoglossus altivelis (ayu fish) (2006)
  • 著者名/発表者名: Uenobe, M., C.Kohchi, N.Yoshioka, A.Yuasa, H.Inagawa, G-I.Soma, et al.
  • 雑誌名: Fish & Shellfish Immunol. (印刷中)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] TNF induces the growth of thymocytes in rainbow trout. (2006)
  • 著者名/発表者名: Hino, K., O.Nakamura, Y.Yoshiura, H.Suetake, Y.Suzuki, T.Watanabe
  • 雑誌名: Dev.Comp.Immunol. 30 ページ: 639-647
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Inherent potential for production of tumor necrosis factor-□ by human intestinal macrophages. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nakata, K., H.Inagawa, T.Nishizawa, T.Honda, C.Kohchi, Y.Tonomoto, H.Yoshimura, N.Nagase, S.Natori, H.Terada, G-I.Soma
  • 雑誌名: Int J Colorectal Dis. 21 ページ: 339-347
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Cloning and characterization of a LPS-regulatory gene having an LPS binding domain in kuruma prawn Marsupenaeus japonicus. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nagoshi, H., H.Inagawa, K.Morii, H.Harada, C.Kohchi, T.Nishizawa, Y.Taniguchi, M.Uenobe, T.Honda, M.Kondoh, Y.Takahashi, G-I.Soma
  • 雑誌名: Molecular Immunology 43 ページ: 2061-2069
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Molecular cloning and expression analysis of a macrophage-colonystimulating factor receptor-like gene from rainbow trout, Oncorhynchus mykiss (2005)
  • 著者名/発表者名: Honda T, Nishisawa T, Uenobe M, Kochi C, Kuroda A, Ototake M, Nakanishi T, Yokomizo Y, Takahashi Y, Inagawa H, Soma G-I.
  • 雑誌名: Molecular Immunology 42 ページ: 1-8
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Molecular cloning and expression analysis of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) interleukin-10 cDNAs. (2005)
  • 著者名/発表者名: Inoue Y, Kamota S, Ito K, Yoshiura Y, Ototake M, Moritomo T, Nakanishi T.
  • 雑誌名: Fish Shellfish Immunol. 18(4) ページ: 335-344
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Molecular cloning and preliminary expression analysis of banded dogfish (Triakis scyllia) CC chemokine cDNAs by use of suppression subtractive hybridization. (2005)
  • 著者名/発表者名: Inoue, Y., Saito, T., M.Endo, C.Haruta, T.Nakai, Moritomo, T., T.Nakanishi.
  • 雑誌名: Immunogenetics 56 ページ: 722-734
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Characteristics of NADPH oxidase genes (Nox2, p22, p47, and p67) and Nox4 gene expressed in blood cells of juvenile Cionaintestinalis. (2005)
  • 著者名/発表者名: Inoue Y, Ogasawara M, Moroi T, Satake M, Azumi K
  • 雑誌名: Immunogenetics 57 ページ: 520-534
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Characterization of respiratory burst activity of ayu (Plecoglossus altivelis) inflammatory neutrophils, comparison with carp (Cyprinus carpio) inflammatory neutrophils. (2005)
  • 著者名/発表者名: Serada K, T.Moritomo, K.Teshirogi, T.Itou, T.Shibashi, Y.Inoue, T.Nakanishi
  • 雑誌名: Fish & Shellfish Immunol. 19(4) ページ: 363-373
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Identification and bioactivities of IFN-gamma in rainbow trout Oncorhynchus mykiss : The first Th1-type cytokine characterized functionally in fish. (2005)
  • 著者名/発表者名: Zou J, Carrington A, Collet B, Dijkstra JM, Yoshiura Y, Bols N, Secombes C.
  • 雑誌名: J Immunol. 175(4) ページ: 2484-2494
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Molecular cloning and expression analysis of a macrophage-colony stimulating factor receptor-like gene from rainbow trout, Oncorhynchus mykiss. (2005)
  • 著者名/発表者名: Honda T, Nishizawa T, Uenobe M, Kohchi C, Kuroda A, Ototake M, Nakanishi T, Yokomizo Y, Takahashi Y, Inagawa H, G Soma
  • 雑誌名: Mol Immunol. 42(1) ページ: 1-8
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Molecular cloning and expression analysis of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) interleukin-10 cDNAs. (2005)
  • 著者名/発表者名: Inoue Y, Kamota S, Ito K, Yoshiura Y, Ototake M, Moritomo T, T Nakanishi
  • 雑誌名: Fish Shellfish Immunol. 18(4) ページ: 335-344
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Molecular cloning and preliminary expression analysis of banded dogfish (Thiakis scyllia) CC chemokine cDNAs by use of suppression subtractive hybridization. (2005)
  • 著者名/発表者名: Inoue, Y, Saito, T., M.Endol, C.Haruta, T.Nakai, Moritomo, T., T.Nakanishi
  • 雑誌名: Immunogenetics 56 ページ: 722-734
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Characteristics of NADPH oxidase genes (Nox2, p22, p47, and p67) and Nox4 gene expressed in blood cells of juvenile Ciona intestinalis. (2005)
  • 著者名/発表者名: Inoue Y, Ogasawara M, Moroi T, Satake M, Azumi K, Moritomo T, T.Nakanishi
  • 雑誌名: Immunogenetics. 57 ページ: 520-534
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Identification and bioactivities of IFN-gamma in rainbow trout Oncorhynchus mykiss : The first Th1-type cytokine characterized functionally in fish. (2005)
  • 著者名/発表者名: Zou J, Carrington A, Collet B, Dijkstra JM, Yoshiura Y, Bols N, C.Secombes
  • 雑誌名: J.Immunol. 175(4) ページ: 2484-2494
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Molecular cloning and sequencing of Japanese pufferfish (Takifugu rubripes) NADPH oxidase cDNAs (2004)
  • 著者名/発表者名: Inouee, Y., Y.Suenaga, Y.Yoshiura, T.Moritomo, M.Ototake, T.Nakanishi.
  • 雑誌名: Dev. Comp. Immunol. 28 ページ: 911-925
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Molecular cloning and sequencing of Japanese pufferfish (Takifugu rubripes) NADPH oxidase cDNAs. (2004)
  • 著者名/発表者名: Inoue Y, Suenaga Y, Yoshiura Y, Moritomo T, Ototake M, T Nakanishi
  • 雑誌名: Dev Comp Immunol. 28(9) ページ: 911-925
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Molecular cloning and expression of shark interleukin-8 cDNA. (2003)
  • 著者名/発表者名: Inoue, Y., Haruta, Usui, K., Moritomo, T., T.Nakanishi
  • 雑誌名: Fish & Shellfish Immunol. 14 ページ: 275-281
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Molecular cloning and sequencing of the silver chimaera (Chimaera phantasma) interleukin-8 cDNA. (2003)
  • 著者名/発表者名: Inoue Y., M.Endo, C.Haruta, T.Taniuchi, T.Moritomo, T.Nakanishi
  • 雑誌名: Fish & Shellfish Immunol. 15 ページ: 269-274
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Identification and characterization of Fugu orthologues of mammalian interleudin-12 subunits. (2003)
  • 著者名/発表者名: Yoshiura, Y., I.Kiryu, A.Fuji-wara, H.Suetake, Y.Suzuki, T.Nakanishi, M.Ototoke
  • 雑誌名: Immunogenetics 55 ページ: 296-306
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Molecular cloning and sequencing of the banded dogfish (Triakis scyllia) interleukin-8 cDNA. (2003)
  • 著者名/発表者名: Inoue Y, Haruta, Usui, K., Moritomo, T., T.Nakanishi
  • 雑誌名: Fish & Shellfish Immunol. 14 ページ: 275-281
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Molecular cloning and sequencing of the silver chimaera (Chimaera phantasma) interleukin-8 cDNA. (2003)
  • 著者名/発表者名: Inoue Y, M.Endo, C.Haruta, T.Taniuchi, T.Moritomo, T.Nakanishi
  • 雑誌名: Fish & Shellfish Immunol. 15 ページ: 269-274
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Identification and characterization of Fugu orthologues of mammalian interleukin-12 subunits. (2003)
  • 著者名/発表者名: Yoshiura Y, Kiryu I, Fujiwara A, Suetake H, Suzuki Y, Nakanishi T, M Ototake
  • 雑誌名: Immunogenetics. 55(5) ページ: 296-306
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より