ウシ周産期の好中球機能低下機構と胎盤・血清の網羅的プロテオーム解析

2004 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15380199
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 稲波 修 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助教授 (10193559)
• 研究分担者: 桑原 幹典 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 教授 (10002081) ; 稲葉 睦 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 教授 (00183179) ; 佐藤 基佳 帯広畜産大学, 獣医学部, 教授 (50003140) ; 太田 利男 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助教授 (20176895) ; 浅沼 武敏 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助手 (40332473)
• キーワード: ウシ / 好中球 / シグナル伝達 / 二次元電気泳動 / ウシ妊娠関連タンパク質(bPAG) / AKT / NADPHオキシダーゼ / ケトン体

研究概要

本研究は乳房炎が頻発する産後直後の免疫機能低下の原因を好中球機能を中心に検索するとともに、乳房炎機能を明らかにすることを目的とする。そのためにウシ好中球機能の活性化のためのシグナル伝達機構の解明を行い、周産期での好中球機能さらには母胎側の好中球機能に影響を与える因子の同定と機能を明らかにするために実験を行った。PKCdelta阻害剤rottlerinを処理すると、OZによるウシ好中球のNADPHオキシダーゼの活性は1/2に低下した。しかし、刺激によるNADPHオキシダーゼコンポーネントp47^<phox>の膜への移動ならびに細胞骨格重合促進には影響を与えなかった。これらの広域PKC阻害剤であるGF109203Xではp47^<phox>の膜への移動を抑制することから、PKCアイソフォームによって制御の様式が違うことが示された。胎盤・血清中での抑制因子の探索では、分子量180kDaのタンパク質、トランスフェリンならびにラクトフェリンが骨髄芽球から好中球への分化時に見られるNADPHオキシダーゼ発現に抑制的な影響を与えることを見いだした。さらに、上記の抑制因子のうち、ウシラクトフェリンは乳汁中に含まれ、乳房での免疫制御に関与している可能性が示唆されたので、これについてサイトカイン誘導に及ぼす効果を検討した。LPSあるいはConA刺激したラットマクロファージと単球のINF-γ、IL-1β、TNF-α、IL-12p40ならびにiNOSのmRNA発現を検討したところ、INF-γとIL-1βのみがLPSで誘導が観察され、ウシラクトフェリンはこれらの炎症性サイトカインの誘導を強く抑制した。以上のことからラクトフェリンは乳房での炎症制御に強く係わっている可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Effects of antioxidants on X-ray- or hyperthermia-Induced apoptosis In human lymphoma U937 cells. (2004)
  • 著者名/発表者名: Cui, Z.-G., Kondo, T., Feril, Jr., L.B., Waki, K., Inanami, O., Kuwabara, M.
  • 雑誌名: Apoptosis 9 ページ: 757-763
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Activation of C-kit by stem cell factor induces radioresistance to apoptosis through ERK-dependent expression of survivin in HL-60 cells (2004)
  • 著者名/発表者名: Hosseinimehr, S.J., Inanami, O., Hamasu, T., Takahashi, M., Kashiwakura, I., Asanuma, T., Kuwabara, M.
  • 雑誌名: Journal of Radiation Research 45 ページ: 557-561
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] A novel anticancer ribonucleoside,1-(3-C-ethynyl-β-D-ribo-pentofuranosyl)cytosine, radiosensitizes apoptosis in tumor cells. (2004)
  • 著者名/発表者名: Inanami, O., Iizuka, D., Iwahara, A., Yamamori, T., Kon, Y., Asanuma, T., Matsuda, A., Kashiwakura, I., Kitazato, K., Kuwabara, M.
  • 雑誌名: Radiation Research 162 ページ: 635-645
• [雑誌論文] Phosphoinositie3-kinase regulates the phosphorylation of NADPH oxidase component p47^<phox> by controlling cPKC/PKCδbut not Akt. (2004)
  • 著者名/発表者名: Yamamori, T., Inanami, O., Nagahata, H., Kuwabara, M.
  • 雑誌名: Biochemical Biophysical Research Communications 316 ページ: 720-730
• [雑誌論文] Protection against malonate-induced ischemic brain injury in rat by a cell-permeable peptidic JNK inhibitor,(L)-HIV-TAT^<48-57>-PP-JBD_<20>, observed by the ADC-mapping MRI method. (2004)
  • 著者名/発表者名: Asanuma, T., Inanami, O., Tabu, K., Waki, K., Kon, Y., Kuwabara, M.
  • 雑誌名: Neuroscience Letters 359 ページ: 57-60
• [雑誌論文] Decreased apoptosis of β-integrin-deficient bovine neutrophils. (2004)
  • 著者名/発表者名: Nagahata, H., Higuchi, H., Teraoka, H., Takahashi, K., Inanami, O., Kuwabara, M.
  • 雑誌名: Immunology and Cell Biology 82 ページ: 32-37
• [雑誌論文] 物質レベルでの時間と空間 (2004)
  • 著者名/発表者名: 桑原 幹典
  • 雑誌名: 癌と臨床 50(13) ページ: 1051-1054
• [雑誌論文] NADPHオキシダーゼ活性化機構とウシ分娩後の好中球機能低下 (2004)
  • 著者名/発表者名: 稲波 修, 脇 研二, 山盛 徹, 浅沼 武敏, 中島崇行, 永幡 肇, 桑原幹典
  • 雑誌名: 獣医生化学 51 ページ: 1-13
• [雑誌論文] Different radiosensitive megakaryocytic progenitor cells exist in steady-state human peripheral blood
  • 著者名/発表者名: Kashiwakura, I., Inanami, O., Abe, Y., Takahashi, T.A., Kuwabara, M.
  • 雑誌名: Radiation Research (印刷中)
• [雑誌論文] Post-irradiation hypoxic incubation of X-irradiated MOLT-4 cells reduces apoptotic cell death by changing the intracellular redox state and modulating SAPK/JNK pathways.
  • 著者名/発表者名: Hamasu, T., Inanami, O., Tsujitani, M., Yokoyama, K., Takahashi, E., Kashiwakura, I., Kuwabara, M.
  • 雑誌名: Apoptosis (印刷中)
• [雑誌論文] Enhanced induction of apoptosis by combined treatment of human carcinoma cells with X rays and death receptor agonists.
  • 著者名/発表者名: Hamasu, T., Inanami, O., Asanuma, T., Kuwabara.M.
  • 雑誌名: Journal of Radiation Research (印刷中)
• [雑誌論文] Reduction of concanavalin A-induced expression of interferon-γ by bovine lactoferrin in feline peripheral blood mononuclear cells.
  • 著者名/発表者名: Kobayashi S., Sato R., Inanami O., Yamamori T., Yamato O., Maede Y., Sato J., Kuwabara M., Naito Y.
  • 雑誌名: Veterinary Immunology and Immunophathology (印刷中)
• [雑誌論文] X Irradiation Induces the Proapoptotic State Independent of the Loss of Clonogenic Ability in Chinese Hamster V79 Cells
  • 著者名/発表者名: Iizuka D., Inanami O., Matsuda A., Kashiwakura I., Asanuma T., Kuwabara M.
  • 雑誌名: Radiation Research (印刷中)