2003 年度実績報告書

TNFにより誘導される活性酸素依存性細胞障害のメカニズムの解明とその治療への応用

研究課題

研究課題/領域番号	15390131
研究機関	順天堂大学
研究代表者	中野裕康順天堂大学, 医学部, 講師 (70276476)
キーワード	TNF / NF-□B / 活性酸素 / MAPキナーゼ / ネクローシス / アポトーシス / TRAF / 抗酸化剤
研究概要	TRAF2/TRAF5ダブルノックアウト(DKO)マウスおよびNF-κBの主なコンポーネントの一つであるp65ノックアウト(p65KO)マウス由来の胎児線維芽細胞(MEF)を用いた実験より、これらの細胞はTNF刺激により通常の野性型細胞では認められない活性酸素(ROS)の蓄積が生じ、このROSが遷延化するMAPキナーゼの活性化やネクローシス誘導に必須の役割を果たしていることを明らかにした。このことは、NF-κBの新たな機能として、通常ではNF-κB依存性に誘導される遺伝子が、ROSの蓄積を抑制していることを示している(EMBO J 22;3898-3909,2003)。そこで、どのような分子の発現上昇を介しているかを明らかにするために、マイクロアレイを用いてTNF刺激により誘導される遺伝子群を野性型細胞およびDKO細胞で比較した。その結果、superoxide dismutase(SOD)2,NADH-ubiquinone oxidoreductase, glutathione S-transferase theta 2などの抗酸化分子の発現が野性型細胞ではTNF刺激により誘導されるのに対し、DKO細胞ではその発現誘導が低下していた。以上よりNF-κBは抗酸化分子の発現誘導を介して、ROSの蓄積を抑制している可能性が示唆された(論文投稿中)。また遷延化するMAPKの活性化に関与するMAPKKKを同定するために、まずこれまでにROSにより活性化されることの知られているASK1の不活性型をDKOおよびp65KO MEFに発現させ、遷延化するMAPKの活性化が抑制されるかを検討した。その結果、残念ながら抑制効果は認められなかったことより、ROS依存性のMAPKの活性化にはASK1は必須ではなく、その他のMAPKKKも関与している可能性が示唆された。

研究成果
(9件)

すべてその他

すべて文献書誌 (9件)

[文献書誌] Sakon, S. et al.: "NF-κB inhibits TNF-induced accumulation of ROS that mediate prolonged MAPK activation and necrotic cell death"EMBO J.. 22. 3898-3909 (2003)
[文献書誌] Hur, G.M.et al.: "The death domain kinase RIP has an essential role in DNA damage-induced NF-κB activation"Genes Dev. 17. 873-882 (2003)
[文献書誌] Luftig, M. et al.: "Epstein-Barr virus latent membrane protein 1 activation of NF-κB through IRAK1 and TRAF6"Proc Natl Acad Sci U S A. 100. 15595-15600 (2003)
[文献書誌] Sakurai, H. et al.: "Tumor Necrosis Factor α-induced IKK Phosphorylation of NF-κB p65 on Serine 536 Is Mediated through the TRAF2,TRAF5,and TAK1 Signaling Pathway"J Biol Chem. 278. 36916-36923 (2003)
[文献書誌] Saitoh, T. et al.: "TWEAK Induces NF-κB2 p100 Processing and Long Lasting NF-□B Activation"J Biol Chem. 278. (2003)
[文献書誌] Chen, M.C.et al.: "The Role of Apoptosis Signal-regulating Kinase 1 in Lymphotoxin-β Receptor-mediated Cell Death"J Biol Chem. 278. 16073-16081 (2003)
[文献書誌] Kanazawa, K. et al.: "TRAF5 functions in both RANKL- and TNFα-induced osteoclastogenesis"J Bone Miner Res. 18. 443-450 (2003)
[文献書誌] Okazaki, T. et al.: "Phosphorylation of serine 276 is essential for p65 NF-κB subunit-dependent cellular responses"Biochem Biophys Res Commun. 300. 807-812 (2003)
[文献書誌] Yamada, T. et al.: "Effects of PU.1-induced mouse calcium calmodulin-dependent Kinase I-like kinase (CKLiK) on apoptosis of murine erythroleukemia cells"Exp Cell Res. (2003)

2003 年度 実績報告書

TNFにより誘導される活性酸素依存性細胞障害のメカニズムの解明とその治療への応用

研究代表者

中野 裕康 順天堂大学, 医学部, 講師 (70276476)

研究成果

[文献書誌] Sakon, S. et al.: "NF-κB inhibits TNF-induced accumulation of ROS that mediate prolonged MAPK activation and necrotic cell death"EMBO J.. 22. 3898-3909 (2003)

[文献書誌] Hur, G.M.et al.: "The death domain kinase RIP has an essential role in DNA damage-induced NF-κB activation"Genes Dev. 17. 873-882 (2003)

[文献書誌] Luftig, M. et al.: "Epstein-Barr virus latent membrane protein 1 activation of NF-κB through IRAK1 and TRAF6"Proc Natl Acad Sci U S A. 100. 15595-15600 (2003)

[文献書誌] Sakurai, H. et al.: "Tumor Necrosis Factor α-induced IKK Phosphorylation of NF-κB p65 on Serine 536 Is Mediated through the TRAF2,TRAF5,and TAK1 Signaling Pathway"J Biol Chem. 278. 36916-36923 (2003)

[文献書誌] Saitoh, T. et al.: "TWEAK Induces NF-κB2 p100 Processing and Long Lasting NF-□B Activation"J Biol Chem. 278. (2003)

[文献書誌] Chen, M.C.et al.: "The Role of Apoptosis Signal-regulating Kinase 1 in Lymphotoxin-β Receptor-mediated Cell Death"J Biol Chem. 278. 16073-16081 (2003)

[文献書誌] Kanazawa, K. et al.: "TRAF5 functions in both RANKL- and TNFα-induced osteoclastogenesis"J Bone Miner Res. 18. 443-450 (2003)

[文献書誌] Okazaki, T. et al.: "Phosphorylation of serine 276 is essential for p65 NF-κB subunit-dependent cellular responses"Biochem Biophys Res Commun. 300. 807-812 (2003)

[文献書誌] Yamada, T. et al.: "Effects of PU.1-induced mouse calcium calmodulin-dependent Kinase I-like kinase (CKLiK) on apoptosis of murine erythroleukemia cells"Exp Cell Res. (2003)

2003 年度実績報告書

中野裕康順天堂大学, 医学部, 講師 (70276476)