2003 年度実績報告書

自然免疫からアレルギーにわたるマスト細胞の活性化機構の分子的解明とその制御

研究課題

研究課題/領域番号	15390163
研究機関	日本大学
研究代表者	羅智靖日本大学, 医学部, 教授 (60230851)
研究分担者	高橋恭子日本大学, 医学部, 助手 (70366574) 鈴木良弘日本大学, 医学部, 助手 (80206549) 下川敏文日本大学, 医学部, 助手 (10339327)
キーワード	マスト細胞 / FcεRI / Toll-like receptors / アレルギー / 自然免疫 / 活性酸素
研究概要	a)β鎖による抑制性シグナル伝達機構の解明 β鎖変異体では,抗原刺激後のLynとの会合が著しく低下しており,下流のSyk, LATなどのシグナル伝達分子の活性化の低下が認められた.しかしながら,β鎖変異体はSHIP, SHP1およびSHP2のフォスファターゼとの会合・活性化が低下しており,これらが抑制性シグナルの破綻に結びついていると考えられる.β鎖変異体トランスジェニックマウスはファウンダーマウスとβ鎖-/-マウスとの掛け合わせを進行させている段階である. b)マスト細胞の脱顆粒に関与する細胞骨格の構成に影響を及ぼす因子の解析 MacGAP高発現RBL.2H3細胞は著明な細胞死を引き起こすために,現状では解析に用いることが不可能である.現在,発現誘導を任意に制御できる系(Tet-ON)への切換えを行っている. c)活性酸素によるマスト細胞活性化調節機構の解明 β鎖とLATの抗原刺激によるチロシンリン酸化は,FcεRIの凝集に附随して産生されるレベルのH_2O_2によって最も強く誘導され,それ以上では逆に減弱した.さらに,NADP(H)oxidase活性の阻害およびH_2O_2の選択的な消去によってこれらの分子のリン酸化は消失した.以上から,細胞内の活性酸素レベルによりマスト細胞の刺激に対する感受性が調節されることが示唆された. d)FcεRI αおよびβ鎖の遺伝子発現制御機構の解明レポーターアッセイによりヒトFcεRIβ鎖遺伝子全領域のうち数カ所の領域が転写制御活性を有することを見いだした.このうちの第4イントロン中の領域について詳細なマッピングを行いシスエレメントを同定し,このエレメントにMZF-1が結合することをゲルシフトアッセイにより確認した.さらに,ヒトマスト細胞株へのMZF-1アンチセンスの導入によりβ鎖mRNA量が上昇し,MZF-1がこのエレメントを介してβ鎖遺伝子の発現を抑制することが明らかとなった. e)Toll-like receptorsを介したマスト細胞活性化の解明 TLR4の情報伝達に係わることが知られているIRAK及びTRAF6のdcminant negative(D/N)体の過剰発現は,LPS刺激によるNF-kB活性化を抑制した.しかし,その上流に位置するMyD88-D/N体の過剰発現は顕著な抑制効果を示さなかった.一方,MyD88非依存的なNF-kBの活性化経路として知られるPKRのD/N体はNF-kBを有意に抑制し,また,PKRの阻害剤である2-aminoprorineはLPSによるNF-kBの活性化を抑制した.

研究成果
(16件)

すべてその他

すべて文献書誌 (16件)

[文献書誌] Suzuki Y, Yoshimaru T, Matsui T, Inoue T, Niide O, Nunomura S, Ra C.: "FcepsilonRI signaling of mast cells activates intracellular production of hydrogen peroxide : role in the regulation of calcium signals"J Immunol.. 171(11). 6119-6127 (2003)
[文献書誌] Tsuge T, Suzuki Y, Shimokawa T, Horikoshi S, Okumura K, Ra C, Tomino Y.: "Monocyte chemoattractant protein (MCP)-1 production via functionally reconstituted Fcalpha receptor (CD89) on glomerular mesangial cells"Imflamm Res.. 52(10). 428-432 (2003)
[文献書誌] Ra C.: "IgE-Fc(epsilon)RI-mast cell paradigm revisited"Arerugi.. 52(7). 573-581 (2003)
[文献書誌] Takahashi K, Nishiyama C, Hasegawa M, Akizawa Y, Ra C.: "Regulation of the human high affinity IgE receptor beta-Chain gene expression via an intronic element"J Immunol.. 171(5). 2478-2484 (2003)
[文献書誌] Hasegawa M, Nishiyama C, Nishiyama M, Akizawa Y, Mitsuishi K, Ito T, Kawada H, Furukawa S, Ra C, Okumura K, Ogawa H.: "A novel -66T/C polymorphism in Fc epsilon RI alpha-chain promoter affecting the transcription activity : possible relationship to allergic diseases"J Immunol.. 171(4). 1927-1933 (2003)
[文献書誌] Nishiyama C, Yokota T, Nishiyama M, Ra C, Okumura K, Ogawa H.: "Molecular cloning of rat transcription factor YY1"Biosci Biotechnol Biochem.. 67(3). 654-658 (2003)
[文献書誌] Akizawa Y, Nishiyama C, Hasegawa M, Maeda K, Nakahata T, Okumura K, Ra C, Ogawa H.: "Regulation of human FcepsilonRI chain gene expression by Oct-1"Int Immunol.. 15(5). 549-556 (2003)
[文献書誌] Fujii Y, Wakahara S, Nakao T, Hara T, Ohtake H, Komurasaki T, Kitamura K, Tatsuno A, Fujiwara N, Hozumi N, Ra C, Kitamura D, Goitsuka R.: "Targeting of MIST to Src-family kinases via SKAP55-SLAP-130 adaptor complex in mast cells(1)"FEBS Lett.. 540(1-3). 111-116 (2003)
[文献書誌] Hasegawa M, Nishiyama C, Nishiyama M, Akizawa Y, Takahashi K, Ito T, Furukawa S, Ra C, Okumura K, Ogawa H.: "Regulation of the human Fc(epsilon)RI alpha-chain distal promoter"J Immunol.. 170(7). 3732-3738 (2003)
[文献書誌] Suzuki Y, Gomez-Guerrero C, Shirato I, Lopez-Franco O, Gallego-Delgado J, Sanjuan G, Lazaro A, Hernandez-Vargas P, Okumura K, Tomino Y, Ra C, Egido J.: "Pre-existing glomerular immune complexes induce polymorphonuclear cell recruitment through an Fc receptor-dependent respiratory burst : potential role in the perpetuation of immune nephritis"J Immunol.. 170(6). 3243-3253 (2003)
[文献書誌] Funaki T, Nakao A, Ebihara N, Setoguchi Y, Fukuchi Y, Okumura K, Ra C, Ogawa H, Kanai A.: "Smad7 suppresses the inhibitory effect of TGF-beta2 on corneal endothelial cell proliferation and accelerates corneal endothelial wound closure in vitro"Cornea.. 22(2). 22:153-22:159 (2003)
[文献書誌] Yoshimura-Uchiyama C, Yamaguchi M, Nagase H, Fujisawa T, Ra C, Matsushima K, Iwata T, Igarashi T, Yamamoto K, Hirai K.: "Comparative effects of basophil-directed growth factors"Biochem Biophys Res Commun.. 302(2). 201-206 (2003)
[文献書誌] Shimokawa T, Ra C.: "C/EBPα and Ets protein Family Members Regulate the Human Myeloid IgA Fc Receptor (FcαR, CD89) Promoter"J Immunol.. 170(5). 2564-2572 (2003)
[文献書誌] Komiya A, Hirai K, Iikura M, Nagase H, Yamada H, Miyamasu M, Ohta K, Morita Y, Ra C, Yamamoto K, Yamaguchi M.: "Induction of Basophil Desensitization in Physiological Medium : Enhancement after IgE-Dependent Upregulation of Surface IgE Binding on Basophils"Int Arch Allergy Immunol.. 130(1). 40-50 (2003)
[文献書誌] Togo S, Shimokawa T, Fukuchi Y, Ra C.: "Alternative splicing of myeloid IgA Fc receptor (FcalphaR, CD89) transcripts in inflammatory responses"FEBS Lett.. 535(1-3). 205-209 (2003)
[文献書誌] Maeda K, Nishiyama C, Tokura T, Akizawa Y, Nishiyama M, Ogawa H, Okumura K, Ra C.: "Regulation of cell type-specific mouse FcepsilonRI beta-chain gene expression by GATA-1 via four GATA motifs in the promoter"J Immunol.. 170(1). 334-340 (2003)

2003 年度 実績報告書

自然免疫からアレルギーにわたるマスト細胞の活性化機構の分子的解明とその制御

研究代表者

羅 智靖 日本大学, 医学部, 教授 (60230851)

研究成果

[文献書誌] Suzuki Y, Yoshimaru T, Matsui T, Inoue T, Niide O, Nunomura S, Ra C.: "FcepsilonRI signaling of mast cells activates intracellular production of hydrogen peroxide : role in the regulation of calcium signals"J Immunol.. 171(11). 6119-6127 (2003)

[文献書誌] Tsuge T, Suzuki Y, Shimokawa T, Horikoshi S, Okumura K, Ra C, Tomino Y.: "Monocyte chemoattractant protein (MCP)-1 production via functionally reconstituted Fcalpha receptor (CD89) on glomerular mesangial cells"Imflamm Res.. 52(10). 428-432 (2003)

[文献書誌] Ra C.: "IgE-Fc(epsilon)RI-mast cell paradigm revisited"Arerugi.. 52(7). 573-581 (2003)

[文献書誌] Takahashi K, Nishiyama C, Hasegawa M, Akizawa Y, Ra C.: "Regulation of the human high affinity IgE receptor beta-Chain gene expression via an intronic element"J Immunol.. 171(5). 2478-2484 (2003)

[文献書誌] Nishiyama C, Yokota T, Nishiyama M, Ra C, Okumura K, Ogawa H.: "Molecular cloning of rat transcription factor YY1"Biosci Biotechnol Biochem.. 67(3). 654-658 (2003)

[文献書誌] Akizawa Y, Nishiyama C, Hasegawa M, Maeda K, Nakahata T, Okumura K, Ra C, Ogawa H.: "Regulation of human FcepsilonRI chain gene expression by Oct-1"Int Immunol.. 15(5). 549-556 (2003)

[文献書誌] Fujii Y, Wakahara S, Nakao T, Hara T, Ohtake H, Komurasaki T, Kitamura K, Tatsuno A, Fujiwara N, Hozumi N, Ra C, Kitamura D, Goitsuka R.: "Targeting of MIST to Src-family kinases via SKAP55-SLAP-130 adaptor complex in mast cells(1)"FEBS Lett.. 540(1-3). 111-116 (2003)

[文献書誌] Hasegawa M, Nishiyama C, Nishiyama M, Akizawa Y, Takahashi K, Ito T, Furukawa S, Ra C, Okumura K, Ogawa H.: "Regulation of the human Fc(epsilon)RI alpha-chain distal promoter"J Immunol.. 170(7). 3732-3738 (2003)

[文献書誌] Funaki T, Nakao A, Ebihara N, Setoguchi Y, Fukuchi Y, Okumura K, Ra C, Ogawa H, Kanai A.: "Smad7 suppresses the inhibitory effect of TGF-beta2 on corneal endothelial cell proliferation and accelerates corneal endothelial wound closure in vitro"Cornea.. 22(2). 22:153-22:159 (2003)

[文献書誌] Yoshimura-Uchiyama C, Yamaguchi M, Nagase H, Fujisawa T, Ra C, Matsushima K, Iwata T, Igarashi T, Yamamoto K, Hirai K.: "Comparative effects of basophil-directed growth factors"Biochem Biophys Res Commun.. 302(2). 201-206 (2003)

[文献書誌] Shimokawa T, Ra C.: "C/EBPα and Ets protein Family Members Regulate the Human Myeloid IgA Fc Receptor (FcαR, CD89) Promoter"J Immunol.. 170(5). 2564-2572 (2003)

[文献書誌] Togo S, Shimokawa T, Fukuchi Y, Ra C.: "Alternative splicing of myeloid IgA Fc receptor (FcalphaR, CD89) transcripts in inflammatory responses"FEBS Lett.. 535(1-3). 205-209 (2003)

[文献書誌] Maeda K, Nishiyama C, Tokura T, Akizawa Y, Nishiyama M, Ogawa H, Okumura K, Ra C.: "Regulation of cell type-specific mouse FcepsilonRI beta-chain gene expression by GATA-1 via four GATA motifs in the promoter"J Immunol.. 170(1). 334-340 (2003)

2003 年度実績報告書

羅智靖日本大学, 医学部, 教授 (60230851)