原発性胆汁性肝硬変における免疫応答機序の解明と診断・治療法の確立

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15390238
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 研究機関: 国立病院長崎医療センター(臨床研究センター)
• 研究代表者: 石橋 大海 国立病院長崎医療センター(臨床研究センター), 臨床研究センター長 (80127969)
• 研究分担者: 小森 敦正 国立病院, 長崎医療センター・臨床研究センター, ウイルス研究室長 (50234901) ; 右田 清志 国立病院, 長崎医療センター・臨床研究センター, 免疫研究部長 (60264214) ; 中村 稔 国立病院, 長崎医療センター・臨床研究センター, 先端技術研究部長 (40217906) ; 喜多 宏人 自治医科大学, 消化器内科学, 助手 (80294974) ; 下田 慎治 九州大学, 大学院・病態修復内科学, 助手 (30279319)
• キーワード: 原発性胆汁性肝硬変 / 自己反応性T細胞 / CD8陽性T細胞 / 病因関連抗原 / 予後予測因子 / 抗gp210抗体 / ミトコンドリア抗原 / ミトコンドリア抗体

研究概要

1.原発性胆汁性肝硬変(PB)の病態に関与するT細胞の機能解析を行なった。その結果、(1)gp210抗原の一部にPDC-E2 163-176反応性T細胞クローンが交差反応性を示すこと、(2)PBC患者由来のPDC-E2反応性T細胞は側副刺激分子非依存性であり健常者由来のPDC-E2反応性T細胞は側副刺激分子依存性であること、(3)側副刺激分子依存性T細胞はanergy状態になりやすいこと、(4)PBC患者からは側副刺激分子非依存性のPDC-E2反応性T細胞が多く同定され、健常者からは側副刺激分子依存性のPDC-E2反応性T細胞が多く同定されることを明らかにした。
2.我々が提唱してきたPBCの発症と進展に関する作業仮説"分子相同性とepitope spreading"にもとづき、核膜孔蛋白gp210に着目し、gp210に対する免疫応答と予後との相関について解析した。まず、gp210蛋白の中で、最も抗原性が強いB細胞エピトープを同定した後、その部位を含む抗原を用いて、ELISAによる抗体の定量系を確立した。この系を用いて、PBC71症例の抗gp210抗体を経時的に定量した。その結果、抗gp210抗体価が、肝不全への進展の独立した予後因子であり、抗gp210抗体はよい予後予測マーカーとなることが明らかとなった。
3.PBCに対する免疫療法を開発することを目的に、PBC患者末梢血より自己抗原特異的T細胞を誘導し、誘導された自己抗原特異的T細胞の機能を解析した。PBC患者末梢からCD8陽性で自己抗原であるPDC-E2抗原を特異的に認識する自己抗原特異的T細胞が誘導可能であった。自己抗原特異的CD8陽性T細胞は抗原特異的な細胞傷害性活性を示した。自己抗原が自己抗体と免疫複合体を形成し、特異的レセプターを介して樹状細胞に取り込まれる過程には、細胞質内のプロテアソームの作用が必要であることが証明された。

研究成果

• [文献書誌] Tanimoto H, Shimoda S, Nakamura M, Ishibashi H, Gershwin M.E, Harada M: "Promiscuous T cells selected by Escherichia coli OGDC-E2 in primary biliary cirrhosis"Autoimmunity. 20. 255-263 (2003)
• [文献書誌] Shimoda S, Nakamura M, Ishibashi H, et al.: "Molecular mimicry of mitochondrial and nuclear autoantigens in primary biliary cirrhosis."Gastroenterology. 124. 1915-1925 (2003)
• [文献書誌] Kamihira T, Shimoda S, Harada K, Kawano A, Handa M, Baba E, Tsuneyama K, Nakamura M, Ishibashi H, et al.: "Characterization of distinct costimulation dependent and independent autoreactive T cell clones in primary biliary cirrhosis"Gastroenterology. 125. 1379-1387 (2003)
• [文献書誌] Masuda J, Omagari K, Ohba K, Hazama H, Kadokawa Y, Kinoshita H, Hayashida K, Ishibashi H, et al.: "Correlation between histopathological findings of the liver and IgA class antibodies to 2-oxo-acid dehydrogenase complex in primary biliary cirrhosis."Digestive Disease and Sciences. 48(5). 932-938 (2003)
• [文献書誌] Ishibashi H, Nakamura M, Shimoda S, Gershwin ME: "T cell immunity and primary biliary cirrhosis"Autoimmunity Reviews. 2(1). 19-24 (2003)
• [文献書誌] 中村 稔, 下田慎治, 石橋大海: "原発性胆汁性肝硬変の成因-ミトコンドリア抗原と免疫応答"臨床消化器内科. 18. 545-551 (2003)
• [文献書誌] Shinji Shimoda, Akiyoshi Nishio, Hiromi Ishibashi, M.Eric Gershwin: "The Pathophysiology of the Biliary Epithelia"Gianfranco Alpini, Domenico Alvaro, Marco Marzioni, Gene LeSage, and Nicholas LaRusso.. 454 (2003)