2003 年度実績報告書

心血管組織石灰化の分子機構の解明とその制御法の開発 -リン共輸送体および骨髄移植を用いた新しいアプローチ-

研究課題

研究課題/領域番号	15390239
研究種目	基盤研究(B)
研究機関	東京大学
研究代表者	大内尉義東京大学, 医学部附属病院, 教授 (80168864)
研究分担者	渡辺徳光東京大学, 医学部附属病院, 医員大池裕美子東京大学, 医学部附属病院, 教務職員 (20359615) 神崎恒一東京大学, 医学部附属病院, 講師 (80272540) 小島太郎東京大学, 医学部附属病院, 医員
キーワード	石灰化 / Na依存性リン共輸送体 / VitD3 / デキサメサゾン / スタチン / AGE / ヒト大動脈由来血管平滑筋細胞 / 糖尿病
研究概要	今年度は、in vitroでの検討を行った。 1)血管平滑筋細胞の石灰化誘導の確立および制御法の関する検討無機リンの添加によりヒト大動脈由来血管平滑筋細胞(HASMC)の石灰化を誘導し、細胞内外のCa沈着量の定量ならびにVon Kossa染色により石灰化を評価した。また、細胞内へのリン取り込みにかかわるNa依存性リン共輸送体(NPC)の活性はH3[32P]O4の細胞内取り込みによって測定した。高濃度の無機リン刺激によって、濃度、時間依存的にHASMCの石灰化は進行、VitD3、デキサメサゾンの添加によってHASMCの石灰化は濃度依存的に増大、NPC活性は高リン刺激によって上昇し、NPC特異的阻害薬であるphosphonoformic acid (PFA)の同時添加によって抑制され、HASMCの石灰化もPFAの濃度依存的に抑制された。また水溶性、脂溶性いずれのスタチンも濃度依存的にリン刺激によるHASMCの石灰化を有意に抑制したが、NPC活性に対してはほとんど抑制効果を示さなかった。これらによりスタチンはリン刺激によるHASMCの石灰化を抑制するが、この作用はNPC活性の抑制を介さない別の機序によると考えられた。 2)血管平滑筋細胞の石灰化誘導過程に対するglucoseおよびadvanced glycation end-product (AGE)の作用の検討ヒト大動脈由来平滑筋細胞(HASMC)を用いて、細胞外リン刺激によって石灰化を誘導し、正常血糖および高血糖刺激による石灰化の変化、また各種AGE(AGE(J),AGE(E),CML(4))の刺激による石灰化の変化をo-cresolphthalein complexone方法で測定した。リン刺激によって、HASMCは濃度依存的、時間依存的に石灰化が増加、NG→HGの条件下ではNG→NGよりも、HG→HGの条件下ではHG→NGよりも石灰化が有意に増加、3種類のAGEの刺激によって濃度依存的に石灰化が増加、という結果が得られた。これらにより、高血糖あるいはAGE増加といった糖尿病環境下では、HASMCの石灰化が促進し、合併症である心血管病変の発生につながる可能性が示唆された。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Watanabe T, Ouchi Y, et al.: "17 beta-estradiol inhibits cardiac fibroblast growth through both subtypes of estrogen receptor."Biochem Biophys Res Commun. 311(2). 454-459 (2003)
[文献書誌] Watanabe T, Ouchi Y, et al.: "Estrogen receptor beta mediates the inhibitory effect of estradiol on vascular smooth muscle cell proliferation."Cardiovasc Res.. 59(3). 734-744 (2003)
[文献書誌] Eto M, Ouchi Y, et al.: "Reduced endothelial vasomotor function and enhanced neointimal formation after vascular injury in a rat model of blood pressure lability."Hypertens Res.. 26(12). 991-998 (2003)
[文献書誌] Son B, Ouchi Y, et al.: "Inhibitory of effect of HMG Co-A reductase inhibitors on vascular smooth muscle cell calcification in vitro."Circ J. 67(suppl.1). 407 (2003)
[文献書誌] Son B, Ouchi Y, et al.: "HMG-CoA reductase inhibitors inhibit human vascular smooth muscle cell calcification ---Another pleiotropic effect of statins."Atherosclerosis Supplements. Vol.4. 213 (2003)
[文献書誌] 孫輔卿, 大内尉義, 他: "ヒト大動脈平滑筋細胞の石灰化に及ぼす高血糖、AGEの影響"第35回日本動脈硬化学会総会抄録・プログラム集. 149 (2003)

2003 年度 実績報告書

心血管組織石灰化の分子機構の解明とその制御法の開発 -リン共輸送体および骨髄移植を用いた新しいアプローチ-

研究代表者

大内 尉義 東京大学, 医学部附属病院, 教授 (80168864)

研究成果

[文献書誌] Watanabe T, Ouchi Y, et al.: "17 beta-estradiol inhibits cardiac fibroblast growth through both subtypes of estrogen receptor."Biochem Biophys Res Commun. 311(2). 454-459 (2003)

[文献書誌] Watanabe T, Ouchi Y, et al.: "Estrogen receptor beta mediates the inhibitory effect of estradiol on vascular smooth muscle cell proliferation."Cardiovasc Res.. 59(3). 734-744 (2003)

[文献書誌] Eto M, Ouchi Y, et al.: "Reduced endothelial vasomotor function and enhanced neointimal formation after vascular injury in a rat model of blood pressure lability."Hypertens Res.. 26(12). 991-998 (2003)

[文献書誌] Son B, Ouchi Y, et al.: "Inhibitory of effect of HMG Co-A reductase inhibitors on vascular smooth muscle cell calcification in vitro."Circ J. 67(suppl.1). 407 (2003)

[文献書誌] Son B, Ouchi Y, et al.: "HMG-CoA reductase inhibitors inhibit human vascular smooth muscle cell calcification ---Another pleiotropic effect of statins."Atherosclerosis Supplements. Vol.4. 213 (2003)

[文献書誌] 孫輔卿, 大内尉義, 他: "ヒト大動脈平滑筋細胞の石灰化に及ぼす高血糖、AGEの影響"第35回日本動脈硬化学会総会 抄録・プログラム集. 149 (2003)

2003 年度実績報告書

大内尉義東京大学, 医学部附属病院, 教授 (80168864)

[文献書誌] 孫輔卿, 大内尉義, 他: "ヒト大動脈平滑筋細胞の石灰化に及ぼす高血糖、AGEの影響"第35回日本動脈硬化学会総会抄録・プログラム集. 149 (2003)