細胞内寄生性細菌に対する宿主反応の解析と細胞・遺伝子治療法の開発

2004 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15390325
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 原 寿郎 九州大学, 大学院・医学研究院, 教授 (40150445)
• 研究分担者: 楠原 浩一 九州大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (20243941) ; 高田 英俊 九州大学, 大学病院, 講師 (70294931) ; 野村 明彦 九州大学, 大学病院, 助手 (00325531) ; 酒井 康成 九州大学, 大学病院, 助手 ; 吉開 泰信 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (90158402)
• キーワード: 結核 / 細胞免疫療法 / 樹状細胞 / IFN-γ / センダイウイルスベクター / T-bet / 細胞遺伝子療法 / 結核感染マウスモデル

研究概要

in vitroで作成した抗原感作樹状細胞を人体に投与すると宿主に強力な抗原特異的免疫反応が誘導されるが、近年これを悪性腫瘍や感染症の治療に利用する研究が進んでいる。我々はこの細胞免疫療法を結核の治療、予防に応用することを目的として、本年度次のような研究を行った。
1.マウス骨髄細胞から樹状細胞を作成し、結核菌抗原であるMPT64ペプチド(MHC class Ia拘束性)およびTB2ペプチド(MHC class Ib拘束性)を感作した。ペプチド感作樹状細胞投与後、脾臓・肺・PECにおける抗原特異的CD8陽性T細胞の経時的変化を調べた。樹状細胞投与6日目に各臓器でMHC class IaおよびIb拘束性抗原特異的CD8陽性T細胞数がともにピークとなった。肺では投与9日目には抗原特異的CD8陽性T細胞が著明に減少したが、PECでは投与40日目でも持続してみられた。またペプチド感作樹状細胞投与から6日後にBCGを気道内および腹腔内感染させ脾臓・肺・腹腔内の生菌数測定し比較したところ気道内感染では腹腔内感染と比べて菌の排除が悪かった。
2.マウス脾臓由来樹状細胞にSeV-Tbetを導入し機能解析をおこなった。SeV-Tbet導入脾臓由来樹状細胞では、CD40、CD86、MHCの発現が高まり、コントロールと比較して樹状細胞からのIFN-γ産生が上昇した。またMLRにおいてTbet-SPDCはコントロールと比べてalloreactive T cellをTh1に有意に誘導した。
樹状細胞を用いた結核菌に対する細胞免疫療法について、結核菌抗原感作DC投与により抗原特異的CD8陽性T細胞が誘導され、さらに菌の排除が認められたことからワクチンとしての効果が期待できた。しかし菌の排除の程度は弱いため、別の結核菌抗原との比較やさらに強力に抗原特異的CD8陽性T細胞を誘導することができるスーパ樹状細胞の作製が不可欠であると考えられた。今後、骨髄由来樹状細胞にもSeV-Tbetを導入しその機能解析を行う予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Female agammaglobulinemia due to the Bruton tyrosine kinase deficiencycaused by extremely skewed X-chromosome inactivation. (2004)
  • 著者名/発表者名: Takada H, Nomura A, 他6名, Hara T
  • 雑誌名: Blood 103 ページ: 185-187
• [雑誌論文] Increased IL-16 levels in hemophagocytic lymphohistiocytosis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Takada H, Nomura A, 他2名, Hara T
  • 雑誌名: J Pediatr Hematol Oncol 26 ページ: 567-573
• [雑誌論文] Dominant expression of interleukin-10 and transforming growth factor-genes in activated T-cells of chronic active Epstein-Barr virus infection. (2004)
  • 著者名/発表者名: Ohga S, Nomura A, Takada H, 他5名, Hara T
  • 雑誌名: J Med Virol 74 ページ: 449-458
• [雑誌論文] Identification of novel MUNC13-4 mutations in familial haemophagocytic lymphohistiocytosis and functional analysis of MUNC13-4-deficient cytotoxic T lymphocytes. (2004)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto K, Takada H, Hara T, 他12名
  • 雑誌名: J Med Genet 41 ページ: 763-767
• [雑誌論文] Microarray analysis of human milk cells : persistent high expression of osteopontin during the lactation period (2004)
  • 著者名/発表者名: Nagatomo T, Takada H, Nomura A, 他4名, Hara T
  • 雑誌名: Clin Exp Immunol 138 ページ: 47-53
• [雑誌論文] CD25+CD4+ regulatory T cells in patients with Kawasaki disease. (2004)
  • 著者名/発表者名: Furuno K, Kusuhara K, Takada H, 他4名, Hara T
  • 雑誌名: J Pediatr 145 ページ: 385-390
• [雑誌論文] Th1 and Th2 cytokine production is suppressed at the level of transcriptional regulation in Kawasaki disease. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kimura J, Takada H, Nomura A, Kusuhara K, 他3名, Hara T
  • 雑誌名: Clin Exp Immunol 137 ページ: 444-449
• [雑誌論文] Human cord blood CD25+CD4+ T cells : a novel immunoregulatory population with naive phenotype. (2004)
  • 著者名/発表者名: Takahata Y, Nomura A, Takada H, 他5名, Hara T
  • 雑誌名: Exp Hematol 32 ページ: 622-629
• [雑誌論文] Tumour necrosis factor receptor-associated periodic syndrome with a novel mutations in the TNFRSF1A gene in a Japanese family. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kusuhara K, Nomura A, Nakao F, Hara T
  • 雑誌名: Eur J Pediatr 163 ページ: 30-32
• [雑誌論文] T-cell-depleted Cd34+ cell transplantation from an HLA-mismatched donor in a low birth weight infant with X-linked severe combined immunodeficiency.
  • 著者名/発表者名: Nomura A, Takada H, 他3名, Hara T
  • 雑誌名: J Pediatric Hematol Oncol (in press)
• [雑誌論文] Bronchiolitis obliterans organizing pneumonia as an initial manifestation in a girl with systemic lupus erythematosus.
  • 著者名/発表者名: Takada H, Nomura A, 他6名, Hara T
  • 雑誌名: Pediatric Pulmonology (in press)
• [雑誌論文] Successful unrelated cord blood transplantation for Epstein-Barr virus-associated lymphoproliferative disease with hemophagocytic syndrome.
  • 著者名/発表者名: Toubo T, Nomura A, Takada H, 他4名, Hara T
  • 雑誌名: Int J Hematol (in press)
• [図書] 今日の治療指針:学校伝染病と対策 (2005)
  • 著者名/発表者名: 原 寿郎(分担執筆)
  • 出版者: 医学書院