| 研究課題/領域番号 |
15390332
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
小児科学
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| 研究機関 | 愛知県心身障害者コロニー発達障害研究所 |
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研究代表者 |
若松 延昭 愛知県心身障害者コロニー発達障害研究所, 遺伝学部, 部長 (60274198)
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| 研究分担者 |
山田 裕一 愛知県心身障害者コロニー発達障害研究所, 遺伝学部, 室長 (70191343)
桑野 良三 新潟大学, 脳研究所・遺伝子実験部門, 助教授 (20111734)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2005
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| キーワード | 知的障害 / 遺伝子 / PLEKHA5 / 常染色体劣性 / 伴性劣性 / 脳萎縮 |
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| 研究概要 |
平成15年-17年に以下の研究成果を得た。
1)染色体6q16と12p12の相互転座、点頭てんかんと著明な精神運動発達遅滞が見られる症例
FISH法、サザン解析と塩基配列の決定により、12p12の転座断点部位にPLEKHA5が局在することを明らかにした。一方、6q16の転座断点部位には遺伝子は存在せず、PLEKHA5が本症の病因遺伝子と考えられた。同遺伝子の神経細胞における作用を明らかにするために、マウスNeuro2a細胞にsiRNAを投与し特異的Plekha5をノックダウンし、20μMのビタミンA(RA)の存在下で3日間培養した。その結果、中等度の神経突起伸長障害が見られた。また、Plekha5の局在が細胞質であることを明らかにした。さらにアフィニティーカラムを用いて、約130kDaのPLEKHA5を精製した。
2)伴性劣性疾患と考えられ、重度の精神運動発達遅滞が見られる症例
家系員11名(内3名患者)の連鎖解析を行い、病因遺伝子座をXq27-terに限局した(DXS1205-ter、最大ロッド値1.10)。現在までにFMR1、SLC6A8など15種類の遺伝子ついて変異解析を行ったが、変異は同定していない。
3)常染色体劣性遺伝の疾患と考えられ、出生後に著明な脳萎縮が進行する症例
家系員10名(内4名が患者)の連鎖解析を行い、病因遺伝子座を2q36近傍に限局した(D2S163-D2S2344、最大ロッド値4.75)。脳で発現している16種類の遺伝子の変異解析を行い、家系内の全症例でSLC19A3にE320Qミスセンス変異をホモ接合体として認め、同変異が病因であると考えられた(正常コントロールには、同変異は認められなかった)。本遺伝子は膜蛋白質をコードしており、thiamineとbiotinのトランスポーターであると考えられている。そこで、同変異を含むSLC19A3を作製し、HEK293細胞に導入しトランスポーター活性を測定した。その結果、SLC19A3(E320Q)は野生型に比べて、[^3H]thiamineの細胞内への取り込みが軽度減少していたが、[^<14>C]biotinはSLC19A3自体に細胞内への取り込み作用が見られず、in vitroの実験では変異のあるSLC19A3の機能解析が不可能であった。現在、Slc19a3(E320Q)を脳神経で特異的に発現するトランスジェニックマウスの作製を行っている。
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