| 研究概要 |
1.<HLA-lb>
HLA-E分子の膜上のHLA-Gとの相違アミノ酸のすべてに、点変異を導入し、147番目以外に11、66番目の置換体でもHLA-E分子の高発現を得たが、147にこれらを加えた(11,147),(66,147),(11,66,147)遺伝子を合成し、安定発現株(CHO細胞、およびブタ血管内皮細胞)を作成し、NK細胞制御効果を検討した。これら3種類の置換体では返って147の単独置換体に劣っていた。また、反対に、HLA-E分子の膜上のHLA-Gとのアミノ置換体で、発現量をさげる部位を検討した。
2.<糖鎖変換>
NK細胞がα-Gal(Galα1,3Galβ1,4GlcNAc)を認識しないとの報告が出たので、これを検証した。ブタの血管内皮より、pig-α1,3galactosyltransferase(α1,3GT)遺伝子をRT-PCR法にてcloningした。次にClass I欠損によりNK細胞の標的となるK562細胞を用意し、これにclasslbであるHLA-G1を遺伝子導入し、NK細胞の反応性を落としたK562を作製した。次にこれに、pig-α1,3GT遺伝子を導入した。
このK562細胞は、αGalエピトープの発現量が高くなるに連れ、NK依存性細胞傷害性も対照群より有意に上昇した。上昇した傷害性はGSIB4レクチンや関連糖鎖によって有意に抑制された。これにより、αGalエピトープとNK細胞依存性細胞傷害との直接関連性が明らかになり、NK細胞上にαGalエピトープを認識するレセプターの存在が示唆された。
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