• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2005 年度 研究成果報告書概要

異種移植におけるNK細胞の制御

研究課題

研究課題/領域番号 15390414
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 胸部外科学
研究機関大阪大学

研究代表者

白倉 良太  大阪大学, 医学系研究科, 教授 (00116047)

研究分担者 岡部 勝  大阪大学, 遺伝情報実験センター, 教授 (30089875)
宮川 周士  大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (90273648)
研究期間 (年度) 2003 – 2005
キーワードHLA-Ib / HLA-G / HLA-E / 補体制御因子 / NK細胞 / delationmutant / FasL / NK細胞依存性細胞傷害
研究概要

<HLA-Ib>HLA-G1とEとの間で種々のhybrid分子を作製し発現を検討した。
まず各ドメインの置換体を作製したところα2ドメインが重要であることが判明。一方、α3ドメインや膜貫通領域の置換体はほとんど発現に影響しなかった。
次にHLA-Eのα2ドメイン内に点変異を導入した。HLA-E分子の147番目のアミノ酸をセリンからシステインに変換すると発現が大きく増加し、NK細胞依存性細胞傷害を効果的に抑制した。
さらに、147番目以外に11、66番目の置換体でもHLA-E分子の高発現を得た。しかし、147にこれらを加えた(11,147),(66,147),(11,66,147)遺伝子を合成し、CHO細胞やブタ血管内皮細胞株を作成し、NK細胞制御効果を検討したが、これらの置換体では147の単独置換体に劣っていた。
<補体制御因子>delta-SCR1-DAF、d-SCR2-DAF、d-SCR3-DAF,d-SCR4-DAFを作製、ブタの血管内皮に遺伝子導入した。d-SCR2-DAF、d-SCR3-DAFは補体、NK細胞の両方に抑制効果を示さなかった。d-SCR4-DAFは補体抑制作用を示したが、NK細胞は抑制しなかった。NK細胞上にDAFに対するレセプターの存在が示唆された。
<FasL>I型でかつ、血清中の酵素切断部位より上方のFasLとHLA-G1のTM部分をつなぐcDNAを合成し、pCXに構築した(PCX-FasL-TM)。CHO細胞およびブタの血管内皮(PEC)に遺伝子導入し発現させたところ、NK細胞にapoptosisを誘導し、NK細胞依存性細胞傷害に対し抑制効果を示した。
<糖鎖変換>NK細胞がα-Gaを認識しないとの報告が出たので、これを検証した。ブタの血管内皮より、pig-α1,3GT遺伝子をcloningした。K562細胞にHLA-G1を遺伝子導入し、NK細胞の反応性を落としたK562を作製した。次にこれに、pig-α1,3GT遺伝子を導入した。
このK562細胞は、αGalの発現量が高くなるに連れ、NK依存性細胞傷害性も対照群より有意に上昇した。上昇した傷害性はGSIB4や関連糖鎖によって有意に抑制された。これにより、NK細胞上にαGalエピトープを認識するレセプターの存在が示唆された。

  • 研究成果

    (18件)

すべて 2006 2005 2004 2003 その他

すべて 雑誌論文 (18件)

  • [雑誌論文] Molecular cloning of pigGnT-I and 1.2 : An application to xenotransplantation.2006

    • 著者名/発表者名
      K Matsunami, et al.
    • 雑誌名

      Biochem Biophys Res Commun (In press)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [雑誌論文] Production of a 1,3-Galactosyltransferase Gene Knockout Pigs Expressing Both Human Decay-Accelerating Factor and N-Acetylglucosaminyltransferase III.2005

    • 著者名/発表者名
      Yoichi Takahagi, et al.
    • 雑誌名

      Mol Reprod Dev. 71

      ページ: 331-338

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [雑誌論文] Adult islet grafts from transgenic pigs with N-acetylglucosaminyltransferase-III (GnT-III) indicate a prolonged survival in the cynomolgus monkey.2005

    • 著者名/発表者名
      Hiroshi Komoda, et al.
    • 雑誌名

      Xenoransplantation 12

      ページ: 209-216

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [雑誌論文] Production of a1,3-Galactosyltransferase Gene Knockout Pigs Expressing Both Human Decay-Accelerating Factor and N-Acetylglucosaminyltransferase III.2005

    • 著者名/発表者名
      Yoichi Takahagi, Tatsuya Fujimura, Shuji Miyagawa, Hiroshi Nagashima, Tamotsu Shigehisa, Ryota Shirakura, Hiroshi Murakami
    • 雑誌名

      Mol Reprod Dev. 71(3)

      ページ: 331-338

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [雑誌論文] Adult islet grafts from transgenic pigs with N-acetylglucosaminyltransferase-III (GnT-III) indicate a prolonged survival in the cynomolgus monkey.2005

    • 著者名/発表者名
      Hiroshi Komoda, Shuji Miyagawa, Takeshi Omori, Yoichi Takahagi, Hiroshi Murakami, Tamotsu Shigehisa, Toshinori Ito, Hikaru Matsuda, Ryota Shirakura
    • 雑誌名

      Xenotransplantation 12(3)

      ページ: 209-216

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [雑誌論文] Human cytomegalovirus UL18 Alleviated Human NK mediated Swine Endothelial Cell Lysis.2004

    • 著者名/発表者名
      Jung-Sik Kim, S.Miyagawa, et al.
    • 雑誌名

      Biochem Biophys Res Commun 315

      ページ: 144-150

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [雑誌論文] The feature of decay accelerating factor (DAF:CD55) on natural killer cell-mediated cytotoxicity.2004

    • 著者名/発表者名
      S Miyagawa, T Kubo, K Matsunami, et al.
    • 雑誌名

      J.mmunol. 173

      ページ: 3945-3952

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [雑誌論文] Cloning the transgenic pigs expressing human decay accelerating factor and N-acetylglucosaminyltransferase III.2004

    • 著者名/発表者名
      Tatsuya Fujimura, et al.
    • 雑誌名

      Cloning and Stem Cells 6

      ページ: 294-301

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [雑誌論文] Skin graft of double transgenic pigs of N-acetylglucosaminyltransferase III (GnT-III) and DAF (CD55) genes survived in cynomolgus monkey for 31 days.2004

    • 著者名/発表者名
      T Fujita, S Miyagawa, et al.
    • 雑誌名

      Transplant Immunology 13

      ページ: 259-264

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [雑誌論文] Human cytomegalovirus UL18 Alleviated Human NK mediated Swine Endothelial Cell Lysis.2004

    • 著者名/発表者名
      Jung-Sik Kim, Seung-Eun Choi, Il-Hee Yun, Jae-Young Kim, Curie, Ahn, Sang-Joon Kim, Jongwon Ha, Eung-Soo Hwang, Chang-Yong Cha, Shuji Miyagawa, Chung-Gyu Park
    • 雑誌名

      Biochem Biophys Res Commun 315(1)

      ページ: 144-150

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [雑誌論文] Delta-short consensus repeat 4-decay accelerate factor (DAF:CD55) inhibits complement-mediated cytolysis but not NK cell-mediated cytolysis2004

    • 著者名/発表者名
      Shuji Miyagawa, Tomoko Kubo, Katsuyoshi Matsunami, Tamiko Kusama, Hiroshi Nozaki, Toshiyuki Moritan, Curie Ahn, Jae Young Kim, Daisuke Fukuta, Ryota Shirakura
    • 雑誌名

      J.Immunol. 173(6)

      ページ: 3945-3952

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [雑誌論文] Cloning the transgenic pigs expressing human decay accelerating factor and N-acetylglucosaminyltransferase III.2004

    • 著者名/発表者名
      Tatsuya Fujimura, Mayuko Kurome, Hiroshi Murakami, Yoichi Takahagi, Katsuyoshi Matsunami, Shinichi Shimanuki, Kohei Suzuki, Shuji Miyagawa, Ryota Shirakura, Tamotsu Shigehisa, Hiroshi Nagashima
    • 雑誌名

      Cloning and Stem Cells 6(3)

      ページ: 294-301

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [雑誌論文] Skin graft of double transgenic pigs of N-acetylglucosaminyltransferase III (GnT-III) and DAF (CD55) genes survived in cynomolgus monkey for 31 days.2004

    • 著者名/発表者名
      Tatsuya Fujita, Shuji Miyagawa, Kyouri Ezoe, Tamotsu Saito, Noriyuki Sato, Yoichi Takahagi, Hiroshi Murakami, Katsuyoshi Matsunami, Ryota Shirakura, Naoyuki Taniguchi
    • 雑誌名

      Transplant Immunology 13(4)

      ページ: 259-264

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [雑誌論文] Downregulation of NK cell-mediated swine endothelial cell lysis by (CD55)2003

    • 著者名/発表者名
      T.Kusama, S.Miyagawa, et al.
    • 雑誌名

      Transtrant Proc 35

      ページ: 529-530

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [雑誌論文] Co-effect of HLA-G1 and Glycosyltransfeses in Reducing NK cell-Mediated Pig Endothelial Cell Lysis2003

    • 著者名/発表者名
      S Miyagawa, R Nakai, et al.
    • 雑誌名

      Transplant Immunol 11

      ページ: 147-153

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [雑誌論文] Downregulation of NK cell-mediated swine endothelial cell lysis by (CD55)2003

    • 著者名/発表者名
      T.Kusama, S.Miyagawa, R.Nakai, M.Yamada, H.Sata, D.Fukuta, K.Matsunami, R.Shirakura
    • 雑誌名

      Transplant Proc 35(1)

      ページ: 529-530

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [雑誌論文] Co-effect of HLA-G1 and Glycosyltransferases in Reducing NK cell-Mediated Pig Endothelial Cell Lysis2003

    • 著者名/発表者名
      Shuji Miyagawa, Rie Nakai, Katsuyoshi Matsunami, Tamiko Kusama, Ryota Shirakura
    • 雑誌名

      Transplant Immunol 11

      ページ: 147-153

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [雑誌論文] Molecular cloning of pigGnT-I and I.2 : An application to xenotransplantation Biochem

    • 著者名/発表者名
      Katsuyoshi Matsunami, Shuji Miyagawa, Kenji Nakagawa, Otsuka Hideaki, Ryota Shirakura
    • 雑誌名

      Biochem Biophys Res Commun (in press)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より

URL: 

公開日: 2007-12-13  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi