| 研究課題/領域番号 |
15390555
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
杉本 朋貞 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (50135729)
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| 研究分担者 |
藤田 雅子 岡山大学, 歯学部, 教務員 (40156881)
山合 友一朗 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (00158057)
市川 博之 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教授 (20193435)
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| キーワード | 三叉神経節 / 1次ニューロン / アポトーシス / TUNEL / caspase-3 / 痛み / 神経切断 / 3次ニューロン |
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| 研究概要 |
幼若ラットにおける末梢神経切断が、受傷1次ニューロンおよび3次ニューロンに及ぼす影響をTUNEL法及びcaspase-3の免疫染色によって検討した。
生後1日目のラット新生仔の眼窩下神経を低体温麻酔下で切断し、4時間から5日後に潅流固定を行い、三叉神経節を摘出した。クリオスタットを用いて作成した10μm厚の切片にTUNEL染色及びcaspase-3の免疫染色を施したところ、それぞれの染色に対する陽性神経細胞が観察された。陽性細胞は正常ラットの神経細胞ではほとんど見られなかったが(<1%)、切断12時間後から、切断側神経節の上顎神経領域で増加し始め、24時間後でピーク(いずれの染色でも約8-9%程度)となり、以後減少して3日後にはほぼ正常値に戻った。切断後24時間の切片にTUNELとcaspase-3の二重染色を施したところ、それぞれの染色に対して陽性を示す細胞の約80%が、他方の染色に対しても陽性を示した。成熟ラットでは神経切断の有無にかかわらず、いずれの染色でも陽性細胞は検出されなかった。
幼若ラットでは、1次求心ニューロンの軸索末梢枝切断によってcaspaseが活性化し、アポトーシスがおこると考えられる。
上記の実験条件で、視床後腹側内側核(VPM)の細胞死について検討中であるが、切断の24時間後に反対側VPMのニューロンにTUNELおよびcaspase-3陽性細胞が出現することを確認し、その経時的変化を分析中である。
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