研究課題/領域番号 |
15405036
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研究機関 | 北海道大学 |
研究代表者 |
杉本 千尋 北海道大学, 人獣共通感染症リサーチセンター, 教授 (90231373)
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研究分担者 |
藤崎 幸蔵 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (00292095)
玄 学南 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (10292096)
井上 昇 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 助教授 (10271751)
横山 直明 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 助教授 (80301802)
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キーワード | タイレリア / バベシア / トリパノソーマ / 中国 / 原虫 |
研究概要 |
新疆地方における馬におけるTrypanosoma evansi感染の実態を明らかにする目的で、LAMPでの検出を行ったところ、90%以上の高率な感染が認められた。また、甘粛省における馬バベシア感染症を調査するため、LAMP Babesia equi, Babesia caballiに対する検出法を開発、それぞれEMA-2、p48を標的にしたプライマーを設計し、高感度で特異性も高い検出系を開発した。これを用いて原虫検出を行ったところ、PCR陰性例からも原虫DNAを高感度に検出することが可能であった。またヒツジBabesiaおよびTheileriaに対するLAMP検査法を開発した。中国にはそれぞれ2種類の異なったヒツジBabesia・Theileriaが分布していると考えられることから、前者ではLingtan, Xinjang株、後者ではTC1,TC2の4株を用いた。既にこれらのsmall subunit RNA遺伝子の塩基配列が決定されていることから、それらの配列からプライマーを設計しLAMPを実施したところ、それぞれの特異な増幅が認められた。検出感度は0.1pgから1ngの間にあった。TC1株に対するLAMPでは近縁である日本かもしかのTheileria原虫とも交差反応性が検出された。今回確立した一連のLAMP法により、中国におけるヒツジのBabesia・Theileria原虫、馬のBabesia・Trypanosoma原虫の感染状況がより簡便に感度よく把握できると考えられた。
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