脱髄型ギランバレー症候群の髄液抗ヘリコバクターピロリVacA抗体と標的分子の解析

2005 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 15500242
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 神経解剖学・神経病理学
• 研究機関: 札幌医科大学
• 研究代表者: 千葉 進 札幌医科大学, 医学部, 助教授 (30167514)
• 研究分担者: 杉山 敏郎 富山医科薬科大学, 医学部, 教授 (00196768) ; 今井 富裕 札幌医科大学, 医学部, 講師 (40231162) ; 野中 道夫 札幌医科大学, 医学部, 助手 (50363685)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2005
• キーワード: ギランバレー症候群 / ヘリコバクターピロリ / 抗VacA抗体 / Na^+-K^+ ATPase α subunit / ミエリンP0蛋白 / 分子相同性

研究概要

免疫組織学的検討:ポリクローナル抗VacA抗体を1次抗体とし、2例のヒト頚髄神経根を用い、DAB法、FITC法にて抗VacA抗体が認識するエピトープの有無を検索した。DAB法では抗VacA抗体により、横断面にて前根の神経線維に相当する部位に斑状・茶褐色の染色を認め、これらは横断面では索状に染色された,FITC法ではDAB法と同様に蛍光顕微鏡にて横断面では斑状に、縦断面では索状の蛍光が認められ、これらは髄鞘に相当すると考えら、ヒト頚髄神経根には抗VacA抗体が認識するエピトープが存在する可能性が示された.
分子生物学的検討:脱髄型ギランバレー症候群(GBS)患者4名の胃粘膜からH.pyloriを分離・培養し、PCRにてVacAの遺伝子配列と対応するアミノ酸配列を決定した.検出したVacAの遺伝子配列に、従来の報告と異なる明らかな変異は認めなかったが、相同性検索の結果、signal sequenceの下流域に、Na^+-K^+ ATPase α subunit、さらにミエリンP0蛋白に部分的相同性をもつ配列が存在することを明らかにし得た.Na^+-K^+ ATPase α subunitおよびミエリンP0蛋白のアミノ酸配列で、VacAと部分的分子相同性を示す以下の3種類のオリゴペプチドを合成した(太字、下線が相同性を示すアミノ酸).
1)Na^+-K^+ ATPase α subunit ; AFFSTNCVEGTARGIIVYTGDRT(23mer)
2)Na^+-K^+ ATPase α subunit ; AFFTTVIIPAIVGGIATGTAVGT(23mer)
3)ミエリンP0蛋白;DVKNPPDIVGKTSQVTLYVF(20mer)
これらオリゴペプチドと、既に抗VacAを有することが確認された脱髄型GBS患者髄液を用いてドットブロット法により、抗VacA抗体とオリゴペプチドとの反応性を検討したが、5名の抗VacA抗体陽性患者の髄液での検討では陽性所見はえられなかった.

研究成果

• [雑誌論文] Autoantibodies against HSP7O family proteins in CSF of multiple sclerosis; :. (2006)
  • 著者名/発表者名: Chiba S, Yonekura K, Yokota S, Tanaka S, Fujii N, Matsumoto H.
  • 雑誌名: J Neurol Sci 241 ページ: 39-43
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Autoantibodies against HSP70 family proteins in CSF of multiple sclerosis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Chiba S, Yonekura K, Yokota S, Tanaka S, Fujii N, Matsumoto H.
  • 雑誌名: J Neurol Sci 241 ページ: 39-43
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] An evaluation of immunological cross-reactvity between Vac-A of Helicobacter pylori and myelin P0 protein using the cerebrospinal fluid from patients with Guillain-Barre syndrome. (2005)
  • 著者名/発表者名: Chiba S, Yonekura K, Yokota S, Tanaka S, Furuyama H, Okabayashi T, Matsumoto H, Fujii N.
  • 雑誌名: Helicobacter 10 ページ: 514
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] An antibody to VacA of Helicobacter pylori in the CSF of patients with Miller-Fisher syndrome. (2004)
  • 著者名/発表者名: Chiba S, Sugiyama T, Yonekura K, Tanaka S, Matsumoto H, Fujii N, Yokota S, Hirayama T.
  • 雑誌名: Neurology 63 ページ: 2184-2187
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Prevalence of anti-heat shock protein in cerebrospinal fluids of patients with Guillain-Barre syndrome. (2004)
  • 著者名/発表者名: Yonekura K, Yokota S, Tanaka S, Kubota H, Fujii N, Matsumoto H, Chiba S.
  • 雑誌名: J Neuroimmunol 156 ページ: 204-209
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Localization and function in ER stress tolelance of Erdj3, a new member of HSP4O family protein. (2004)
  • 著者名/発表者名: Nakanishi K, Kamiguchi K, Torigoe T, Nabeta C, Hirohashi Y, Asanuma H, Tobioka H, Koge N, Harad IO, Ichimiya S, Noagno H, Yano S, Chiba S, Matsumoto H, Sato N.
  • 雑誌名: Cell stress and Chaperone 9 ページ: 253-264
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] 中毒性・薬剤性ニューロパチー (2004)
  • 著者名/発表者名: 千葉 進, 田中真悟, 古山裕康
  • 雑誌名: Medicina 41 ページ: 1329-1331
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Helicobacter pylori 感染と神経疾患. (2003)
  • 著者名/発表者名: 千葉 進, 田中真悟
  • 雑誌名: Helicobacter Research 7 ページ: 327-331
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Structures, biological activities and antigenic properties of Helicobacter pylori lipopolysaccharide. (2003)
  • 著者名/発表者名: Yokota S, Amano K, Chiba S, Fujii N.
  • 雑誌名: Recent Reserch Developments in Microbiology 7 ページ: 251-267
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Antibodies against VacA of Helicobacter pylon can recognize the epitopes of the human peripheral nerve myelin protein. (2003)
  • 著者名/発表者名: Chiba S, Sugiyama T, Matsumoto H, Yonekura K, Tanaka S et al.
  • 雑誌名: Helicobacter 8(4) ページ: 445
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より