| 研究課題/領域番号 |
15570089
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| 研究機関 | 崇城大学 |
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研究代表者 |
大野 素徳 崇城大学, 工学部, 教授 (30038434)
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| 研究分担者 |
千々岩 崇仁 崇城大学, 工学部, 講師 (30331060)
服部 正策 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (00164864)
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| キーワード | マムシ亜科ハブ属ヘビ / 南西諸島 / 進化 / 系統 / ホスホリパーゼA_2アイソザイム / アミノ酸配列 / cDNA |
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| 研究概要 |
本研究は、トカラ列島、奄美諸島、沖縄諸島、先島諸島、台湾に棲息するクサリヘビ科マム亜科ハブ属ヘビの進化と系統を、毒腺ホスホリパーゼA_2(PLA_2)アイソザイムのアミノ酸配列、cDNAの塩基配列を基にして、解析することを目的とする。平成15年度に先島諸島のサキシマハブ毒より新規な2つの[Arg^<49>]PLA_2を精製し、TeBPI、TeBPIIと名付けた。TeBPIのアミノ酸配列を決定した。また[Arg^<49>]PLA_2をコードする2つのcDNAをクローニングした。今年度はTeBPIIのアミノ酸配列の決定を行い、約90%の配列を決定した。1つのcDNAからのアミノ酸配列はTeBPIのそれと完全に一致した。TeBPIIの部分アミノ酸配列は今1つのcDNAからのアミノ酸配列に相当するものであった。TeBPIとTeBPIIは第3位のアミノ酸がValとIleの違いのみであり1残基ポルモルフィズムを示した。これらはともに121アミノ酸残基のタンパク質であった。一方、クローニングした[Asp^<49>]PLA_2 cDNAは122アミノ酸残基をコードしていた。トカラハブ毒からのPLA_2アイソザイムの分画を行い、中性[Asp^<49>]PLA_2を単一成分にまで精製した。また塩基性PLA_2アイソザイムの存在を確認した。トカラハブ毒腺のcDNAライブラリーを作製し、PLA_2アイソザイムcDNAの網羅的スクリーニングを試みた。驚いたことに、2つのクローンはサキシマハブと同じ[Arg^<49>]PLA_2をコードするものであった。また得られた[Asp^<49>]PLA_2 cDNAはサキシマハブ毒腺の[Asp^<49>]PLA_2 cDNAと同じ配列であった。ここにいたってトカラハブ毒腺cDNAライブラリーとして取り扱っていたものは、実際はサキシマハブ毒腺cDNAライブラリーであることがわかった。取急ぎトカラハブ毒腺cDNAライブラリーを作製し、所期の目的を達成するようにする。
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