研究概要 |
筆者は転写因子Ad4BP/SF-1のラット胚発生過程における発現解析によって、副腎皮質と生殖腺の両原基が由来する共通原基を見出し、副腎皮質原基、生殖腺原基への分化過程に4つのステップが存在することを明らかにした。その共通原基の分化機構を明らかにすることを目的とし、分化関連因子であるPref-1,WT1,Ad4BP/SF-1,Emx2の相互発現の高感度な同時検出系を構築するために、ウサギ以外の動物種でPref-1(ニワトリ)、WT1(モルモット)の抗体を作成した。得られたPref-1抗体により、副腎皮質の球状層のPref-1発現細胞は、副腎皮質の幹細胞候補層(aldosterone, corticosterone共に産生しない層)内においてIZA(inner zone antigen)と相補的に発現するが、境界が以前よりも明瞭に認識され、細胞内局在型Pref-1を分泌型Pref-1よりも強く認識するものと思われた。副腎皮質-生殖腺の共通原基の分離期においては生殖腺原基のPref-1発現は消失していくが、生殖腺原基と中腎との境界領域にPref-1発現が継続し、ちょうどAd4BP/SF-1を発現する生殖腺の後方境界をなした。又、中腎のWT1発現と副腎皮質原基のPref-1発現が相補的に発現しており、その後、WT1は分離後の副腎皮質周囲領域にも発現が認められた。これらの結果は副腎皮質、生殖腺の分化における中腎領域の新たな関与機構の存在を示唆した。ニワトリPref-1抗体はラットに加えてマウスPref-1をも認識し、遺伝的蓄積の多いマウスの解析が可能になった。又、培養細胞においてWT1がPref-1の発現を抑制する結果を得たが、in vivo の胎児共通原基においても、WT1がPref-1の遺伝子発現を制御することを明らかにするために、WT1抗体を用いたPref-1遺伝子のChIP assayのセットアップを行っている。
|