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幼若ホルモン(JH)はエクダイソン(Ec)とともに、昆虫の発育・生殖・生理を広く制御しているテルペン系のホルモンである。Ecの作用に関しては分子レベルでの理解が進んでいるが、JHに関しては知見が乏しいのが現状である。当研究ではJHの分子レベルでの作用機構を明らかにするため、蚊およびショウジョウバエを材料として以下の実験を行った。まず、JHがEcの作用を修飾・阻害する例が知られていることに基づいて、JH依存的にEcの作用に遺伝子発現調節レベルで干渉する候補因子として、蚊のダイオキシンレセプター(Ahr)の機能解析を行った。Ahrを強制発現させたショウジョウバエ由来の培養細胞・S2において、培養液にJHあるいはその合成アナログ(JHA)を加えると、ダイオキシン応答配列(XRE)を持つレポーター遺伝子からの転写が増強されたが、研究を進めるとAhrは直接にはXREに結合しないことが明らかとなり、この系におけるAhrのJH依存的な効果は間接的なものであることが示唆された。S2細胞におけるJH作用の仲介者を探索した結果、ショウジョウバエのMethoprene-tolerant(Met)遺伝子にたどり着き、その産物・METの機能解析を行い、以下の結果を得た:1)METはJHIIIをnMレベルの親和性で結合する;2)METを酵母の転写因子・GAL4のDNA結合ドメインとの融合タンパクとしてS2細胞で発現させると、培養液に加えたJHあるいはJHAに反応して、GAL4応答配列を持つレポーターからの転写が、濃度依存的に活性化される;3)METの細胞内局在性はJHの有無に関わらず核である。以上の結果からMETはJHレセプターであることが強く示唆された。
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