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1.目的
ラムノガラクツロナンII(RG-II)は、植物細胞壁多糖ペクチンの一部を構成する多糖である。細胞壁中では、2分子のRG-II単量体(mRG-II)が1分子のホウ酸により架橋されdRG-II-B複合体を形成し、細胞壁構造を安定化している。このことが必須微量元素ホウ素の主な機能である。単離されたdRG-II-B複合体には、特定の金属イオンが結合しており、複合体の安定生成に寄与している。しかし、金属イオンの結合サイトについては明らかにされていない。昨年度は、mRG-IIのランタノイド結合サイトは、直鎖と複数の側鎖から形成されていることを示した。今年度は、dRG-II-B中のホウ酸陰イオンの金属結合サイトへの関与を調べた。
2.方法
シュガービートdRG-II-B 2.2mgを40mM酢酸アンモニウム緩衝液(pH5.0)500μLに溶解し、半量をcontrolとし、残り半量に0.1M EuCl_3 5μLを加えEu処理試料とした。試料溶液を5mmφNMR試料管に入れ、^<11>B NMR測定を行った。
3.結果
dRG-II-B中のホウ酸エステル(1:2)に由来するピークは、controlとEu処理のどちらのスペクトルにも、全く同じ-9.6ppmに観測された。また、サイズ排除HPLC/ICP-MS測定により、controlのdRG-II-Bに結合している金属は主にCaであること、およびEu処理によりそのCaがほとんどEuに交換されたことが確認された。この結果から、dRG-II-Bに結合している金属は、ホウ酸陰イオンには直接は配位しておらず、dRG-II-Bの金属結合サイトはホウ酸陰イオンからはある程度以上離れていることが示された。
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