研究課題/領域番号 |
15580294
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研究機関 | 麻布大学 |
研究代表者 |
山田 隆紹 麻布大学, 獣医学部, 教授 (20126460)
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研究分担者 |
久末 正晴 麻布大学, 獣医学部, 助手 (80333144)
斑目 広郎 麻布大学, 獣医学部, 助教授 (20173768)
辻本 元 東京大学, 農学部, 教授 (60163804)
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キーワード | イヌ / 幹細胞 / 肝臓 / HGF / c-Met |
研究概要 |
平成15年度は、骨髄幹細胞が肝臓細胞へ分化しうる能力を有することを検証するために、(1)イヌのHGFレセプタ-(c-Met)の遺伝子クローニング、(2)骨髄細胞の純化、(3)骨髄細胞から肝臓細胞への培養について検討を行った。 本年度では、イヌのHGFレセプタ-(c-Met)の遺伝子クローニングを行い、全長の塩基配列解析を終了した。その結果、イヌのc-Met cDNAのコード領域が4419塩基、1383個のアミノ酸で構成され、アミノ酸レベルでヒトやマウスと90%前後類似していることが明らかとなった。さらに、犬の主要臓器におけるc-Met遺伝子の発現を検討したところ、肝臓と同様に骨髄細胞においてもc-Met遺伝子の発現が認められることが明らかとなり、骨髄細胞へHGFが作用する可能性を示唆した(Neo et al.,J Vet Med sci,投稿中)。 そこで現在、セルソーティングシステムを用いて、抗CD34抗体やSP細胞および骨髄細胞に特異的な表面抗原に対する抗体を用いて、骨髄細胞から造血幹細胞を多数含有する細胞集団を試み、条件設定等を行い検討している。さらに、HGF存在下で骨髄幹細胞を短期培養し、得られた細胞が肝臓細胞であるかどうかをアルブミンやα-フェトプロテインなどのm-RNA発現により検討しているが、これらも現在解析中である。
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