NK細胞上の抑制性レセプターKLRG1の未知リガンドの同定とその機能の解明

2004 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 15590057
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物系薬学
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 松本 直樹 東京大学, 大学院新領域創成科学研究科, 助教授 (40239108)
• 研究分担者: 山本 一夫 東京大学, 大学院新領域創成科学研究科, 教授 (20174782)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• キーワード: NK細胞 / T細胞 / 先天性免疫 / レクチン様レセプター / KLRG1 / リガンド / カドヘリン / 発現クローニング

研究概要

我々の身体は、T,B細胞を中心とする獲得免疫系とともにNK細胞を含む先天性免疫系によって、病原体やがんから防御されている。NK細胞によるそれら異物の認識はNK細胞上に発現する活性化レセプター群と抑制性レセプター群によって行われている。KLRG1はNK細胞、T細胞の一部に発現する抑制性レセプターであるが、その認識するリガンドならびにその機能については不明である。本研究では、KLRG1のリガンドを同定することにより、KLRG1の免疫系における機能を明らかにすることを目指した。KLRG1リガンドを同定するため、KLRG1の細胞外領域を大腸菌で発現し、リフォールディングすることにより可溶型KLRG1を作製した。これをプローブとして、KLRG1リガンド発現細胞をスクリーニングした結果、上皮系細胞にKLRG1リガンドが発現していることが明らかになった。この結果は、さらにKLRG1キメラ受容体を用いた真核細胞発現系においても確認された。KLRG1リガンドを同定するため、KLRG1リガンド発現細胞からmRNAを抽出し、cDNAライブラリーを作製し、ほ乳類細胞に発現させ、可溶型KLRG1の結合を指標とした発現スクリーニングにより、KLRG1リガンドcDNAを単離することに成功した。得られたcDNAを再度導入したほ乳類細胞に、KLRG1が結合した。また、可溶型KLRG1を用いたリガンド沈降法により明らかにしたKLRG1リガンドタンパク質の性状と得られたcDNAがコードするタンパク質の性状はよく一致した。以上の結果から、このcDNAがKLRG1リガンドをコードするものと結論した(未発表データ)。今回KLRG1リガンドとして同定した分子は、正常な上皮組織に普遍的に発現する一方、がん細胞の悪性化にともない発現が減少することが報告されている。NK細胞上に発現するKLRG1は正常な上皮系組織のNK細胞による傷害を防ぐ一方、悪性度の高いがん細胞の識別に関与する可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Killer cell lectin-like receptor GI binds three members of the classical cadherin family to inhibit NK cell cytotoxicity (2006)
  • 著者名/発表者名: Ito M., Maruyama T., Saito N., Koganei S, Yamamoto K., Matsumoto N.
  • 雑誌名: J. Exp. Med. 203 ページ: 289-295
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Killer cell lectin-like receptor G1 binds three members of the classical cadherin family to inhibit NK cell cytotoxicity (2006)
  • 著者名/発表者名: Ito M., Maruyama T., Saito N., Koganei S., Yamamoto K., Matsumoto N.
  • 雑誌名: J.Exp.Med. 203 ページ: 289-295
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Regulation of innate (NK cells) and acquired immunity (T cells) by the NK cell receptor KLRG1, which recognizes cadherins (in Japanese) (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto N.
  • 雑誌名: Chugai-Igakusha, Annual Review Men-eki 2007 (Ed. K.Okumura, T.Hirano, ＆ A.Sato) ページ: 132-141
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Carbohydrate-binding specificity of lectins by a multiplexed bead-based flow cytometric assay (2005)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto K., Ito S., Yasukawa F., Matsumoto N.
  • 雑誌名: Anal. Biochem. 336 ページ: 28-38
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] B-la cell origin of the murine B lymphoma line BCLIcharacterized by surface markers and bacterial reactivity of its surface IgM (2005)
  • 著者名/発表者名: Kogamei S., Ito M., Yamamoto K., Matsumoto N.
  • 雑誌名: Immunol. Letters 98 ページ: 232-244
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Modulating the Actions of NK Cell-Mediated Cytotoxicity Using Lipid-PEG(n) and Inhibitory Receptor-Specific Antagonistic Peptide Conjugates (2005)
  • 著者名/発表者名: Chung H.A., Tajima K., Kato K., Matsumoto N., Yamamoto K., Nagamune T.
  • 雑誌名: Biotechnol. Prog. 21 ページ: 1226-1230
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Carbohydrate-binding specificity of lectins by a multiplexed bead-based flow cytometric assay (2005)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto K., Ito S., Yasukawa F., Matsumoto N.
  • 雑誌名: Anal.Biochem. 336 ページ: 28-38
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] B-1 a cell origin of the murine B lymphoma line BCLlcharacterized by surface markers and bacterial reactivity of its surface IgM (2005)
  • 著者名/発表者名: Koganei S., Ito M., Yamamoto K., Matsumoto N.
  • 雑誌名: Immunol.Letters 98 ページ: 232-244
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Modulating the Actions of NK Cell-Mediated Cytotoxicity Using Lipid-PEG(n) and Inhibitory Receptor-Specific Antagonistic Peptide Conjugates (2005)
  • 著者名/発表者名: Chung H.A., Tajima K., Kato K., Matsumoto N., Yamamoto K., Nagamune T.
  • 雑誌名: Biotechnol.Prog. 21 ページ: 1226-1230
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] A species-specific determinant of β_2-microglobulin required for Ly49A recognition of its MHC class I ligand (2004)
  • 著者名/発表者名: Mitsuki M., Matsumoto N., Yamamoto K.
  • 雑誌名: International Immunol. 16 ページ: 197-204
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] augmentation of NK cell-mediated cytotoxicity to tumor cells by inhibitory NK cell receptor blockers. (2004)
  • 著者名/発表者名: Tajima K., Matsumoto N., Ohmori K., Wada H., Ito M., Suzuki K., Yamamoto K.
  • 雑誌名: International Immunol. 16 ページ: 385-393
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] The inhibitory NK Cell Receptor CD94/NKG2A and the Activating Receptor CD94/NKG2C Bind the Top of HLA-E through Mostly Shared but Partly Distinct Sets of HLA-E Residues (2004)
  • 著者名/発表者名: Wada H., Matsumoto N., Maenaka K., Suzuki K., Yamamoto K.
  • 雑誌名: Eur. J. Immunol. 34 ページ: 81-90
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] A species-specific determinant of β2-microglobulin required for Ly49A recognition of its MHC class I ligand (2004)
  • 著者名/発表者名: Mitsuki M., Matsumoto N., Yamamoto K.
  • 雑誌名: International Immunol. 16 ページ: 197-204
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Augmentation of NK cell-mediated cytotoxicity to tumor cells by inhibitory NK cell receptor blockers. (2004)
  • 著者名/発表者名: Tajima K., Matsumoto N., Ohmori K., Wada H., Ito M., Suzuki K., Yamamoto K.
  • 雑誌名: International Immunol. 16 ページ: 385-393
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] The inhibitory NK Cell Receptor CD94/NKG2A and the Activating Receptor CD94/NKG2C Bind the Top of HLA-E through Mostly Shared but Partly Distinct Sets of HLA-E Residues (2004)
  • 著者名/発表者名: Wada H., Matsumoto N., Maenaka K., Suzuki K., Yamamoto K.
  • 雑誌名: Eur.J.Immmunol. 34 ページ: 81-90
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [図書] Annual Review 免疫 2007 (2006)
  • 著者名/発表者名: 松本直樹
  • 総ページ数: 132-141
  • 出版者: 中外医学社
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より