| 研究概要 |
胎生ラット下垂体においてpit-1を発現する前葉細胞の前駆細胞が分化し、この細胞が母細胞となって成長ホルモン細胞(GH細胞)とプロラクチン細胞(PRL細胞)がさらに分化すると考えられている。これまでの研究から胎生期にGH細胞が先に分化し、PRL細胞はGH細胞から分化するとの考え方が支配的であった。われわれはこの問題を再検討するためにGHおよびPRL遺伝子のプロモーターに蛍光蛋白遺伝子をつなげたプラスミドを開発し、このプラスミドを胎生下垂体前葉初代培養細胞に導入、細胞の分化過程を観察する実験系の確立を目指した。しかし、胎生期の分化間もない前葉細胞ではこれらのプロモーターの活性が低く、十分な量の蛍光蛋白の発現は見られなかった。そこで、本年度の実験では単一の前葉細胞に由来するcDNAから各種前葉ホルモンcDNAをPCRにより増幅する技術を開発し、これを用いてGH細胞およびPRL細胞がそれぞれ単一のホルモンmRNAのみを持つのか、あるいは両方を持つもの(somatomammotroph)があるのかを検討した。その結果、単一ホルモンmRNAを持つGH細胞はすべてのGHmRNA細胞の約半数にしか過ぎず、予想外に多くの細胞がGHとPRLmRNAの両方を発現していることが明らかとなった。このことはGH細胞やPRL細胞といった細胞型が固定したものではないことを示唆している。今後は単一細胞の中でGH発現とPRL発現がどの様に制御されているかを明らかにすることがGH, PRL細胞の分化機構解明のためにも重要であると思われる。
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