| 研究概要 |
貪食・分泌に関わる分子機構を理解することは、赤痢アメーバの生存と寄生の基盤を理解する上で不可欠である。赤痢アメーバは宿主細胞を貪食する際に、貪食胞(ファゴソーム)とは異なり、他種生物に例がない前貪食胞(PPV)と呼ばれる空砲を形成した。PPVの形成とファゴソームへの加水分解酵素の輸送にはRab5,Rab7Aが関与しており、Rab5はPPVの形成に、Rab7AはPPVの形成と加水分解酵素のPPVを経由したファゴソームへの輸送に関与した。PPVはファゴソームへの加水分解酵素の輸送・活性化・貯蔵に機能していることが示唆された。
また、Rab7A結合分子を原虫粗抽出液から分離し、レトロマーと呼ばれる複合体の3種類のコンポーネントのホモログ(Vps26,Vps35,Vps29)と同定した。更にVps26のRab7Aとの結合を証明した。貪食過程で複合体はRab7Aと同様の細胞内動態を示した。Rab7A過剰発現により細胞内プロテアーゼ活性が50%減少し、この減少はVps26共発現により消失した。従ってレトロマー様複合体とRab7Aと結合により赤痢アメーバ加水分解酵素のファゴソームへの輸送が調節されていることが明らかとなった。
更にゲノム情報を用いたRab7のアイソタイプの同定とその機能解析を行った。Rab7には9種類のアイソタイプが存在していた(Rab7A-7I)。Rab7B,7D,7EアイソタイプはRab7Aとは異なる細胞内局在を示し、これらのRab7アイソタイプが重複しない機能をもつことが示唆された。赤痢アメーバにおけるレトロマー様複合体による加水分解酵素輸送の調節並びにRab7の機能的多様性に関する知見は赤痢アメーバの病原機構の分子論的理解に大きく貢献した。
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