| 研究概要 |
細菌逆転写酵素は,細胞内でcDNA産物であるmulticopy single-stranded DNA(msDNA)と呼ばれるRNA-DNA複合体の合成に必須の酵素である。細菌逆転写酵素遺伝子(ret)は,ゲノム上でmsDNAの配列をコードする領域とともにレトロンと呼ばれるオペロンを形成しており,一種のレトロエレメントであると考えられている。本研究では,病原細菌における逆転写酵素とそのcDNA産物であるmsDNAの生理的意義,特に病原性との関連について明らかにすることを目的としている。
これまでの解析でコレラ菌の病原性と逆転写酵素あるいはレトロンとの間に何らかの関連性があることが示唆されている。研究代表者らの作製したO139コレラ菌(Vibrio cholerae O139)の逆転写酵素欠損変異株と野生株における遺伝子発現状況を比較するため,マイクロアレイを利用した網羅的な解析を行った。コレラ菌の病原性因子を誘導することが知られているAKI培地を用いた培養条件で両株から全RNAを調製し,解析を行った。その結果,ret変異株においてコレラ毒素遺伝子(ctxAB)や腸管定着因子遺伝子(tcpA)あるいは同じToxRSレギュロンのompU遺伝子などの発現量増加が認められた。この結果は,逆転写酵素あるいはmsDNAが何らかの形でコレラ菌の病原因子の発現調節に関与していることを示している。また,野生株においては糖の代謝に関与する遺伝子群の発現量が増加していることが明らかになった。今後,これらの遺伝子の発現調節に関与している転写制御因子に注目し,解析を進める必要がある。
その他に食中毒起因菌のVibrio mimicusのレトロンの一部のクローニングにも成功している。
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