研究分担者 |
桑原 知巳 徳島大学, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 助教授 (60263810)
片岡 佳子 徳島大学, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 講師 (40189303)
中山 治之 徳島大学, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 助手 (80294669)
有持 秀喜 徳島大学, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 助手 (30311822)
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研究概要 |
1.シアロ複合糖鎖の取り込み・分解に関与すると考えられる27-kbの遺伝子領域(sguクラスター)を同定した。このクラスターは、9つの糖鎖分解酵素遺伝子(nanH3,nahA, estA, estS, bmnA, nahB, nahC, bgaA,およびbgaB)、3つの複合糖鎖結合外膜蛋白質遺伝子(BF1737,BF1739およびBF1740)、1つのkelch様蛋白質遺伝子(BF1735)から構成されていた。 2.B.fragilis菌株間におけるsguクラスターの構造多様性をPCRを用いて検討したところ、試験した12株全ての菌株においてこの領域は保存されていた。 3.sguクラスターの各遺伝子の発現をRT-PCRによって解析したところ、nanH3,nahA, estA, estS遺伝子の発現は、シアル酸やムチン・fetuinなどのシアロ複合糖鎖によって誘導されたが、グルコースやアシアロ複合糖鎖によって抑制された。また、bmnA, nahB, nahC, BF1737およびbgaA遺伝子は糖の種類に関係なく構成的に発現していた。BF1735,BF1739,BF1740およびbgaB遺伝子もまた構成的に発現していたが、グルコースの添加により発現が抑制された。 4.B.fragilisの病原性におけるnanH3、estAおよびestS遺伝子の役割を検討するためにマウス腹腔内膿瘍形成モデルを用いたところ、pNhAF1(nanH3,estA, estS)、pH3F-2(nanH3)あるいはpVNAND241(estS)を保有するB.uniformisはpVAL-1(control)を保有するB.uniformisと比較して膿瘍形成率が有意に高かった。また、pNhAF1あるいはpH3F-2を保有するB.uniformisは、pVAL-1を保有するB.uniformisより全膿瘍数においても有意に多かった。
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