| 研究課題/領域番号 |
15590421
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| 研究機関 | 高知大学 |
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研究代表者 |
今井 章介 高知大学, 医学部, 教授 (60232592)
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| 研究分担者 |
黒田 正幸 高知大学, 医学部, 助手 (00253005)
前田 明彦 高知大学, 医学部, 助手 (50335931)
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| キーワード | EBウイルス(EBV) / dominant-negative EBNA1 / EBV関連腫瘍 / 遺伝子治療 / アデノウイルスベクター |
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| 研究概要 |
EBウイルス(EBV)nuclear antigen1(EBNA1)はEBVゲノム(episome)が感染細胞内で複製・維持されるために必須な唯一のウイルス蛋白である。本研究では、独自にEBNA1変異体遺伝子を作製、これが野生型EBNA1の機能阻害によりEBV感染細胞からウイルスepisomeを駆逐するかどうかを検討し、以下の成果を得た。
1.wtEBNA1のN末端側の大半を欠如するEBNA1変異体を構築、これをアデノウイルスベクターに搭載した。これを用いて、細胞からのEBV episomeの維持/脱落がモニター可能な人為的EBV陽性変換細胞株(リンパ球系、上皮細胞系)を被験細胞として、作製したEBNA1変異体が効率的EBV episome脱落促進に機能するdominant-negative(dn)EBNA1であることを確認した。
2.さらにこのdnEBNA1が、EBV陽性のB細胞性腫瘍(バーキットリンパ腫)に対してもウイルスゲノムを追い出し、同時にそれに伴って腫瘍細胞の悪性増殖形質も抑制することをin vitroで確認した。またこの作用は、野生型(wild-type、wt)EBNA1の転写プロモーターであるQp活性抑制によるwtEBNA1のde novo合成阻害、ならびにアポトーシス誘導、という複数のメカニズムが関与することを見い出した。
3.dnEBNA1の抗腫瘍効果をバーキットリンパ腫xenograft SCIDマウスモデルを用いたin vivo実験系でも確認した。
以上の成績は、我々のdnEBNA1がEBV関連腫瘍性疾患に対してウイルス特異的に有効な新規遺伝子治療用分子となる可能性を示すものである。
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