| 研究概要 |
1.マルチプレックスPCR法およびマイクロチップ電気泳動法を用いたY染色体欠失解析システムの開発
男性不妊症において無精子症は重要な原因の一つであり、Y染色体の無精子症候補領域(AZFa,b,c)の微少欠失が報告されている。これらを効率的に解析するための新しいプライマーセットを作製し、マイクロチップ電気泳動法を用いたY染色体欠失解析システムの開発を行った。今年度は、さらに迅速に解析が行えるように、血液直接PCR法または固定化DNAを用いるPCR法を用いた方法について検討を行った。島津製作所の、Ampdirect Plusを用いると、血液からDNAを抽出することなく、全血0.2μlを直接添加してPCRを行うことが可能であり、良好な成績が得られた。
2.男性不妊症における遺伝的背景の研究
Y染色体上の無精子症候補領域の一つAZFbに存在するHSFY遺伝子の発現、並びにコードする遺伝子産物の組織分布、および細胞内局在について解析した。HSFY遺伝子は精巣に特異的に発現しており、精子形成に時期特異的な役割を持っている可能性があると考えた。また、HSFYのマウス相同遺伝子であるmHSFYLが精巣に特異的に発現していることを見出したため、mHSFYL/HFSY類似タンパク質の進化的な保存性について研究した。その結果、mHSFYL/HFSYは、精子形成において標的遺伝子の転写制御など、進化的に保存された役割をもっているのではないかと考えた。
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