| 研究課題/領域番号 |
15590490
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
病態検査学
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| 研究機関 | 徳島大学 |
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研究代表者 |
梅野 真由美 徳島大学, 医学部, 助手 (00213497)
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| 研究分担者 |
新家 利一 徳島大学, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 助教授 (10311820)
中堀 豊 徳島大学, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 教授 (10172389)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2005
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| キーワード | Y染色体欠失 / 男性不妊症 / AZF / マルチプレックスPCR法 / マイクロチップ電気泳動法 / HSFY |
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| 研究概要 |
1.マルチプレックスPCR法を用いた男性不妊症に関する迅速かつ簡便なY染色体欠失解析システムの開発
男性不妊症において、特発性無精子症や乏精子症は重要な原因の一つであり、そのうちの約10%の患者において、Y染色体長腕上の無精子症候補領域(AZF)の部分欠失が報告されている。これらのY染色体欠失を効率的に解析するための新しいプライマーセットを作製して、Multiplex PCR法を用いた迅速解析システムを開発した。
Y染色体上のSRY、AMELY、DBY、RBMY、DAZおよびX染色体上の遺伝子AMELXを加えた計6座位について、Multiplex PCR法により同時に増幅できるようなプライマーを設計した。プライマーセットの特徴として、Y染色体の短腕から長腕にかけて、目的遺伝子座位が順番に整列するように、PCR産物のサイズを段階的に増加させ、検出後直ちに欠失判定ができるように工夫した。さらに、マイクロチップ電気泳動システムを用いた迅速検出法について検討したところ、12検体同時に4分以内での検出が可能であり、欠失部位も容易に判定できた。
我々が開発したY染色体欠失解析システムは、性別確認判定と共に男性不妊症患者のAZF領域の欠失を含む構造異常を同時に判定する、効率的なスクリーニングシステムとして有用であると考える。
2.男性不妊症における遺伝的背景の研究
Y染色体上の無精子症候補領域の一つAZFbに存在するHSFY遺伝子の発現、並びにコードする遺伝子産物の組織分布、および細胞内局在について解析した。HSFY遺伝子は精巣に特異的に発現しており、精子形成に時期特異的な役割を持っている可能性があると考えた。
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