| 研究概要 |
本研究の目的は,これまでに開発した手法を用いて,ストレスホルモンあるいは内分泌撹乱物質の神経組織および細胞内情報伝達への影響を調べることである。
本年度の研究では,コルチゾール微量存在下での培養細胞に誘導したアポトーシスの変化を検討するとともに,いくつかのアポトーシス関連因子に与える影響ついても検討した。これまでの研究の成果によれば,微量のコルチゾールでもアポトーシスを阻害している可能性が示された。そこで,アポトーシスの発生における細胞内情報伝達の系のどこが阻害あるいは助長されているかを調べるために,情報伝達系でのいくつかの主要なDNAの抗体を用いて,それらのタンパク質が正常に機能しているかどうかを検討した。
腎細胞由来のPC12細胞を用い,アポトーシスの誘導は培養液中の栄養因子であるFetal Bovine Serumの除去あるいは6-hydroxydopaminの添加により行った。アポトーシスによるDNA損傷はTUNEL法、アポトーシス関連因子BaxおよびBcl-2の発現量はRT-PCR法により求めた。
100nMおよび10uMのコルチゾールは細胞に誘導したアポトーシスを抑制する事が認められた。また,その関連因子であるBaxやBcl-2も変動する傾向が示された。これらの関連因子はBcl-2遺伝子によるミトコンドリア内アポトーシス関連機能に含まれるものであり,微量なコルチゾールがこの遺伝子系に影響を与えることが考えられた。
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