胃上皮細胞におけるp38MAPK持続活性化マウスの作成と分化、増殖異常の解析

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15590645
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 筒井 秀作 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (10359846)
• 研究分担者: 清原 達也 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (50322178) ; 篠村 恭久 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (90162619)
• キーワード: 胃上皮細胞 / p38MAPK / Helicobacter Pylori / MKK6 / 分化・増殖 / ガストリン

研究概要

Helicobacter Pylori(以下H.Pylori)感染は胃潰瘍、十二指腸潰瘍の病因としてばかりでなく胃上皮細胞の分化・増殖や胃癌の病因としても重要である。H.Pylori胃炎におけるにガストリン・IL-1bの関与に関する臨床的・基礎的研究の結果、我々はH.Pylori、ガストリンおよびIL-1bによって胃上皮細胞で活性化される共通の分子としてのNF-kappaBとp38MAPKの重要性につき着目している。特にp38MAPKの機能解析は十分ではないが、炎症、細胞死、分化増殖に深く関与することが示唆されている分子である。
現在我々はMKK6のconstitutive active formのコンストラクトからPCR法を用いて両端にBgl II制限酵素サイトをつけたMKK6(DE)cDNAを作成し、これを発現ベクターpcDNA3.1(-)のBamHIサイトとLigationさせたコンストラクトを作成し、胃上皮細胞株MKN-28に導入した胃上皮細胞株を樹立した。今後細胞の増殖、形態変化につき検討していく予定である。
またpHKATP-hGH1のBam H1 siteにBgl IIcutしたMKK6(DE)cDNAをLigationしてコンストラクトを作成し、Ec 1XI/ScaIおよびEcoRIにて制限酵素処理しHKATP/MKK6/hGHキメラ遺伝子を精製後、マウス受精卵に注入してP38MAPKを持続活性化させたトランスジェニックマウスを作成中である。

研究成果

• [文献書誌] Kiyohara T: "A decreased number of c-kit expressing cells in a patients with afferent loop syndrome"J Gastroenterol. 38(4). 390-394 (2003)
• [文献書誌] Ogasa M: "Gastrin activates nuclear facter kappaB(NfkappaB) through a protein kinase C dependent pathway involving NfkappaB inducing kinase, inhibitor kappaB (IkappaB) kinase, and tumor necrosis factor receptor associated factor6(TRAF6) in MKN-28 cells tansfected with gastrin receptor"Gut. 52(6). 813-819 (2003)
• [文献書誌] Kamada Y: "Enhanced carbon tetrachloride-induced liver fibrosis in mice lacking adiponectin"Gastroenterology. 125(6). 1796-1807 (2003)
• [文献書誌] Kinoshita K: "Absence of c-kit gene mutations in gastrointestinal stromal tumors from neurofibromatosis type I patients"J Pathol.. 202(1). 80-85 (2004)
• [文献書誌] Nishibayashi H: "Helicobacter pylori-induced enlarged-fold gastritis is associated with increased mutagenicity of gastric juice, increased oxidative DNA damage, and an increased risk of gastric carcinoma"J Gastroenterol Hepatol.. 18(12). 1384-1391 (2003)
• [文献書誌] Hirota S: "Gain-of-function mutations of platelet-derived growth factor receptor alpha gene in gastrointestinal stromal tumors"Gastroenterology. 125(3). 660-667 (2003)