2003 年度実績報告書

冠攣縮性狭心症の成因に対する分子生物学的アプローチ:とくに収縮に関わる細胞内情報伝達系の検討

研究課題

研究課題/領域番号	15590712
研究機関	弘前大学
研究代表者	奥村謙弘前大学, 医学部, 教授 (20185549)
研究分担者	長内智宏弘前大学, 医学部, 助教授 (00169278)
キーワード	Vasospastic angina / Hypertension / Phospholipase C / Transgenic mouse / Intracellular calcium / Acethylcholine
研究概要	本態性高血圧におけるPhospholipase C(PLC)δ1活性の亢進本態性高血圧症患者を対象に、皮膚切片よりExplant法により線維芽細胞を培養し、膜画分を遠心法により分離した。PLC活性をphosphatydilinositol 4,5-bisphosphateを基質として測定した。PLC活性は正常血圧者に比較して、本態性高血圧症患者では約2倍高値であり、血圧値とPLC活性との間に正相関が認められた。また、PLCのKm値は本態性高血圧症患者で正常血圧者に比較して有意に低値を示し、Vmaxは両群間で差が認められなかった。Western blot法の検討では、PLCのisoformは主にδ1であり、その蛋白の発現量には両群間で差が認められなかった。従って、本態性高血圧症患者におけるPLC活性の亢進は、酵素の質的な異常に起因するものと推測され、病態の形成と密接な関連性を有すると考えられた。変異体PLC-δ1過剰発現マウスの作製最近我々は、冠攣縮性狭心症患者の皮膚線維芽細胞においてPLC-δ1の257番目のアミノ酸がアルギニンからヒスチジンへ置換するR257H亜型が存在することを発見した。R257H亜型では、basal PLC-δ1活性の亢進と、アセチルコリン刺激に対する細胞内カルシウム反応の亢進が認められた。冠攣縮性狭心症の病態形成におけるR257H亜型の役割を解明するために、変異体PLC-δ1過剰発現マウスを作製中である。変異体PLC-δ1を冠動脈で過剰発現させるために、ヒト血管平滑筋alpha-smooth muscle actinのプロモーターを上流に接続した発現ユニットを作製し、PLC-δ1とGAPDHのreal time PCRを用いてホモとヘテロを鑑別した。現在までに、1組のホモの作製に成功している。表現型に異常は認められず、発育・成長も順調である。

研究成果

(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Kosugi T, Okumura K, et al.: "Phosplipase C activity is enhanced in skin fibroblasts obtained from patients with essential by hypertension"J Hypertens. 21. 583-590 (2003)
[文献書誌] Osanai T, Okumura K, et al.: "Circulating coupling factor 6 in human hypertension : role of reactive oxygen species"J Hypertens. 21. 2323-2328 (2003)
[文献書誌] Osanai T, Okumura K, et al.: "Effect of shear stress on asymmetric dimethylarginine release from vascular endothelial cells"Hypertension. 42. 985-990 (2003)
[文献書誌] Saitoh M, Okumura K, et al.: "High plasma level of asymmetric dimethylarginine in patients with acutely exacerbated congestive heart failure : role in reduction of plasma NO level"Heart Vessels. 18. 177-182 (2003)
[文献書誌] Guan W, Okumura K, et al.: "Effect of allopurinol pretreatment on free radical generation after primary coronary angioplasty for acute myocardial infarction"J Cardiovasc Pharm. 41. 699-705 (2003)
[文献書誌] Osanai T, Okumura K, et al.: "Plasma concentration of coupling factor 6 and cardiovascular events in patients with end-stage renal disease"Kidney Int. 64. 2291-2297 (2003)
[文献書誌] 奥村謙: "内科学(杉本恒明ほか編集),5-6-2)狭心症"朝倉書店. 601-610 (2003)

2003 年度 実績報告書

冠攣縮性狭心症の成因に対する分子生物学的アプローチ:とくに収縮に関わる細胞内情報伝達系の検討

研究代表者

奥村 謙 弘前大学, 医学部, 教授 (20185549)

研究成果

[文献書誌] Kosugi T, Okumura K, et al.: "Phosplipase C activity is enhanced in skin fibroblasts obtained from patients with essential by hypertension"J Hypertens. 21. 583-590 (2003)

[文献書誌] Osanai T, Okumura K, et al.: "Circulating coupling factor 6 in human hypertension : role of reactive oxygen species"J Hypertens. 21. 2323-2328 (2003)

[文献書誌] Osanai T, Okumura K, et al.: "Effect of shear stress on asymmetric dimethylarginine release from vascular endothelial cells"Hypertension. 42. 985-990 (2003)

[文献書誌] Saitoh M, Okumura K, et al.: "High plasma level of asymmetric dimethylarginine in patients with acutely exacerbated congestive heart failure : role in reduction of plasma NO level"Heart Vessels. 18. 177-182 (2003)

[文献書誌] Guan W, Okumura K, et al.: "Effect of allopurinol pretreatment on free radical generation after primary coronary angioplasty for acute myocardial infarction"J Cardiovasc Pharm. 41. 699-705 (2003)

[文献書誌] Osanai T, Okumura K, et al.: "Plasma concentration of coupling factor 6 and cardiovascular events in patients with end-stage renal disease"Kidney Int. 64. 2291-2297 (2003)

[文献書誌] 奥村 謙: "内科学(杉本恒明ほか編集),5-6-2)狭心症"朝倉書店. 601-610 (2003)

2003 年度実績報告書

奥村謙弘前大学, 医学部, 教授 (20185549)

[文献書誌] 奥村謙: "内科学(杉本恒明ほか編集),5-6-2)狭心症"朝倉書店. 601-610 (2003)