熱ショック蛋白質gp96と樹状細胞による細胞免疫療法および免疫遺伝子治療

2004 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 15590789
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 呼吸器内科学
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 山崎 浩一 北海道大学, 病院, 講師 (20312358)
• 研究分担者: 田村 保明 札幌医科大学, 医学部, 助手 (80322329) ; 谷 憲三朗 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (00183864) ; 秋田 弘俊 北海道大学, 大学院・医学研究科, 教授 (70222528)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• キーワード: 熱ショック融合蛋白質 / gp96 / 免疫遺伝子治療 / CD8 CTL / 癌拒絶

研究概要

腫瘍細胞から精製された熱ショック蛋白質gp96は、小胞体内に存在し腫瘍細胞内の抗原ペプチドを保持しており、このgp96-ペプチド複合体を免疫すると腫瘍あるいはペプチド特異的なT細胞免疫応答を誘導できることが知られている。そこで我々は、免疫応答のさらなる増強を目的として、あらかじめ腫瘍由来のgp96でパルスした樹状細胞(DC)の治療ワクチンとしての有効性をマウス肺癌(LLC ; Lewis Lung Cancer)にOVAを遺伝子導入したLLC-OVAモデルにおける治療的抗腫瘍効果を検討した。DCは骨髄細胞をGM-CSF下で5日間培養したものを用いた。1×10^5個のLLC-OVAをC57BL/6マウスの右側腹部に接種し、day3、7、10、14に左側腹部にLLC-OVAから抽出したgp96、DCまたはgp96でパルスしたDCをそれぞれ接種した。その結果、LLC-OVA由来gp96およびDCにより腫瘍の増大は軽度に抑制されたが、LLC-OVA由来のgp96でパルスしたDCではさらに腫瘍の増大が抑制された。一方で抗腫瘍効果がペプチドを介して誘導されているかを確認するために、LLC-OVA由来gp96をパルスしたDCとOT-1細胞を共培養し、IFN-γの放出を検討したが、OVAに特異的な反応は確認できなかった。しかし、LLC-OVA由来のgp96でパルスしたDCによる治療後のリンパ節中にはOVA特異的CD8陽性細胞が多く認められ、OVA特異的なCTLが増加したことを確認できたが、その差はわずかなものであった。さらに、gp96のDCへの取り込みを共焦点レーザー顕微鏡を用いて検討したところ、DCに取り込まれたgp96はエンドソームへ移行して保持するペプチドをMHC class I分子に受け渡している可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Expression of RCAS1 in human gastric carcinoma : A potential mechanism of immune escape (2004)
  • 著者名/発表者名: Nakamura Y, Yamazaki K, Oizumi S, Nakashima M, Watanabe T, Dosaka-Akita H, Nishimura M.
  • 雑誌名: Cancer Sci 95 ページ: 260-265
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] B7-H1 expression in non-small cell lung cancer and its relationship with tumor-infiltrating lymphocytes and their PD-1 expression (2004)
  • 著者名/発表者名: Konishi J, Yamazaki K, Azuma M, Kinoshita I, Dosaka-Akita H, Nishimura M.
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 10 ページ: 5094-5100
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Soluble Receptor-binding Cancer Antigen Expressed on Siso Cells (RCAS1) in Pleural Fluid : A Potential Diagnostic Marker for Malignant Pleural Effusion (2004)
  • 著者名/発表者名: Aoe K, Hiraki A, Maeda T, Murakami T, Yamazaki K, Sugi K, Takeyama H
  • 雑誌名: Chest 126 ページ: 1195-1197
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] B7-H1 expression in non-small cell lung cancer and its relationship with tumor-infiltrating lymphocytes and their PD-1 expression. (2004)
  • 著者名/発表者名: Konishi J, Yamazaki K, Azuma M, Kinoshita I, Dosaka-Akita H, Nishimura M.
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 10 ページ: 5094-5100
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Soluble Receptor-binding Cancer Antigen Expressed on Siso Cells (RCAS1) in Pleural Fluid : A Potential Diagnostic Marker for Malignant Pleural Effusion. (2004)
  • 著者名/発表者名: Aoe K, Hiraki A, Maeda T, Murakami T, Yamazaki K, Sugi K, Takeyama H.
  • 雑誌名: Chest 126 ページ: 1195-1197
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] GM-CSF gene-transduced tumor cells combined with tumor-derived gp96 inhibit tumor growth in mice. (2003)
  • 著者名/発表者名: Kojima T, Yamazaki K, Tamura Y, Ogura S, Tani K, Konishi J, Shinagawa N, Kinoshita I, Hizawa N, Yamaguchi E, Dosaka-Akita H, Nishunura M.
  • 雑誌名: Hum Gene Ther 14 ページ: 715-728
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] CD4^+ T cells in cancer stroma, not CD8^+ T cells in cancer cell nests, are associated with favorable prognosis in human non-small cell lung cancers. (2003)
  • 著者名/発表者名: Wakabayashi O, Yamazaki K, Oizumi S, Hommura F, Kinoshita I, Ogura S, Dosaka-Akita H, Nishimura M.
  • 雑誌名: Cancer Sci 94 ページ: 1003-1009
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] GM-CSF gene-transduced tumor cells combined with tumor-derived gp96 inhibit tumor growth in mice (2003)
  • 著者名/発表者名: Kojima T, Yamazaki K, Tamura Y, Ogura S, Tani K, Konishi J, Shinagawa N, Kinoshita I, Hizawa N, Yamaguchi, E, Dosaka-Akita H, Nishimura M.
  • 雑誌名: Human Gene Therapy, Hum Gene Ther 14 ページ: 715-728
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] CD4^+ T cells in cancer stroma, not CD8^+ T cells in cancer cell nests, are associated with favorable prognosis in human non-small cell lung cancers (2003)
  • 著者名/発表者名: Wakabayashi O, Yamazaki K, Oizumi S, Hommura F, Kinoshita I, Ogura S, Dosaka-Akita H, Nishimura M.
  • 雑誌名: Cancer Sci 94 ページ: 1003-1009
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より