| 研究課題/領域番号 |
15590845
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
腎臓内科学
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| 研究機関 | 山梨大学 |
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研究代表者 |
姚 建 山梨大学, 大学院・医学工学総合研究部, 助教授 (50303128)
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| 研究分担者 |
北村 正敬 山梨大学, 大学院・医学工学総合研究部, 教授 (90333062)
追手 巍 新潟大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (60018744)
森岡 哲夫 新潟大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教授 (00210146)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2004
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| キーワード | メサンギウム細胞 / 内皮細胞 / gap結合 / connexin43 / nitric oxide / PDGF / protein kinase A / Calcium |
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| 研究概要 |
私どもは正常なメサンギウムと内皮細胞機能を果たすために細胞間の情報伝達が重要であるとの認識からメサンギウムと内皮細胞におけるギャップ結合の役割を検討しました。得られた成果は以下の通りである。
1)培養糸球体内皮細胞とメサンギウム細胞において、機能的なキャップ結合が存在することをdyetransfer assayを用いて示した。さらに、ギャップ結合蛋白であるCx43、Cx40が存在することを抗Cx40、Cx43抗体を用いた蛍光抗体法及びウエスタンブロッテイグ法を用いて明らかにした。内皮細胞とメサンギウム細胞間のコネキシンの局在を免疫電顕(immune gold法)を用いて明らかにした。
2)細胞間のギャップ結合がPDGFにより閉鎖され、その閉鎖はPI3キナーゼ、ERK(extracellular signal-regulated kinase)、Cx43のリン酸化と関連していることを証明した。またメサンギウム細胞のギャップ結合が実際にメサンギウム細胞機能とかかわっているかを検討した。一個のメサンギウム細胞の圧刺激を加えるとその細胞だけでなく間に複数の細胞を介して繋がっているが、直接接触のない細胞にも収縮が引き起こされること。
3)血管内皮細胞由来の血管拡張性物質として代表的な一酸化窒素(NO)が、cGMP、cAMP経路を介して糸球体メサンギウム細胞コネキシン蛋白の発現を促進し、ギャップ結合を充進させることを明らかにした。
4)メサンギウム細胞の増殖・遊走因子であるPDGFをcAMPと一緒に作用させると、メサンギウム細胞コネキシン蛋白の発現を劇的に促進し、メサンギウム細胞の分化を誘導した。これにはPI3キナーゼを介したシグナル伝達系が働いている。
以上の結果から、ギャップ結合を介した細胞間communicationが糸球体生理・病理学的に重要な役割を果たすことが示唆されました。
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