| 研究概要 |
重症筋無力症(MG)のB細胞エピトープであるAChR61-76に対するコンプリメンタリーペプチドRhCA67-16ペプチドを作成し,ヒト抗体産生マウスであるKMマウスに感作を行ない,モノクローナル抗体2つを得た.この二つのモノクローナル抗体を使い,MG患者血清中のイディオタイプ抗体の検出を試みた.方法は,モノクローナル抗体(IgG1,kappaおよびIgG3,kappa)をbiotinで標識し,これをstreptavidineをcoatingした96穴ELISAplateに固着させた.このELISA plate に希釈患者血清と反応させ,モノクローナル抗体と反応するイディオタイプ抗体を回収した.回収したイディオタイプ抗体は,sandwich ELISAによるIgGの定量を行なった.測定感度は1.5μg/ml〜1.5ng/mlである。対象はMG患者38例(男性13例、女性25例、平均年齢49.4±14.9)と正常対照群37例(男性15例、女性22例、平均年齢42.9±6.1)で正常対照群のIgG量の平均値+3SDをcutoffとすると,0.41μg/mlが正常上限値となった.この正常上限値以上を陽性例と判定した。
MG38例のうち10例で陽性であった.AChR陽性群と陰性群にわけて検討すると,AChR陰性群ではすべてイディオタイプ抗体は検出されなかった.
コンプリメンタリーペプチドモノクローナル抗体により,患者血清中のイディオタイプ抗体の検出が可能であった.今後この抗体により認識されるイディオタイプ抗体のMG惹起性の検討をする予定である.
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