無ガンマグロブリン血症の新規原因遺伝子LRRC8とそのホモログの機能解析

2004 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 15591105
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 小児科学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 原 純一 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (00238156)
• 研究分担者: 太田 秀明 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (60322187)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• キーワード: LRRC8 / LRRC8ファミリー / B細胞の分化

研究概要

われわれは最近、先天性無ガンマグロブリン血症の患児より新規遺伝子であるLRRC8を単離・同定した。B細胞の分化の解明に重要と考えられるため、LRRC8の機能解析およびホモログの発現解析をおこなった。
1)抗LRRC8ポリクローナル抗体を用いた解析により、LRRC8は末梢血B細胞に強く発現し、骨髄ではLRRC8はB細胞の成熟とともに発現されることが明らかとなった。また、脳組織ではマイクログリアで発現され、脾臓においてはマクロファージに発現が認められた。
2)LRRC8には4個のホモログが存在し、極めて高いアミノ酸相同性を有しておりひとつのファミリー(LRRC8ファミリー)を構成していた。リンパ球の活性化や単球の刺激実験の結果から、このファミリーは、リンパ球・単球の増殖や活性化に関与していることが示唆された。
3)LRRC8の白血病への関与をサザンハイブリダイゼーション法を用いて臨床検体で検討したが、白血病・リンパ腫細胞に大きな遺伝子異常は認めなかった。抗LRRC8抗体を用いたフローサイトメトリー法による解析においても異常はみられなかった。
4)LRRC8の機能をさらに詳細に検討するために、LRRC8欠損マウスを作成中である。マウスLRRC8遺伝子は2つのエクソンから成るが、遺伝子全長の8割以上を占めるexon1を欠失したターゲッティングベクターを作成して、現在、ES細胞への導入さらにはキメラマウスの作成中である。

研究成果

• [雑誌論文] LRRC8 involved in B cell development belongs to a novel family of leucine-rich repeat proteins (2004)
  • 著者名/発表者名: Keiko K, Matsuda-Hashii Y, Hara J, et al.
  • 雑誌名: FEBS Letters 564(1-2) ページ: 147-152
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] LRRC8 involved in B cell development belongs to a novel family of leucine-rich repeat proteins (2004)
  • 著者名/発表者名: Kubota K, Kim JY, Sawada A, Tokimasa S, Fujisaki H, Matsuda-Hashii Y, Ozano K, Hara J.
  • 雑誌名: FEBS Letters 564(1-2) ページ: 147-152
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] A congenital mutation of the novel gene LRRC8 causes agammaglobuloinemia in humans (2003)
  • 著者名/発表者名: Sawada A, Matsuda-Hashii Y, Hara J, et al.
  • 雑誌名: J Clin Incest 112(11) ページ: 1707-1713
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] A congenital mutation of the novel gene LRRC8 causes agammaglobulinemia in humans (2003)
  • 著者名/発表者名: Sawada A, Takihara Y, Kim JY, Matsuda-Hashii Y, Tokimasa S, Fujisaki H, Kubota K, Endo H, Onodera T, Ohta H, Ozono K, Hara J.
  • 雑誌名: J Clin Incest. 112(11) ページ: 1707-1713
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より