研究概要 |
CD14^+CD16^+単球は抗原提示能を持つproinflammatoryな亜群と考えられており、結核やAIDS、川崎病などの炎症性疾患や感染症で増加することが知られている。サルコイドーシス患者の末梢血を調べると、CD14^+CD16^+単球が血清ACE値と有意な相関をもって増加することを報告した。そこで、単球亜群の肉芽腫形成に関わるCD14+CD16+単球の役割をin vitroにて検討する。患者末梢血から磁気細胞分離システムを用いて全単球を分離後、フローサイトメトリーにてCD16+細胞を回収したが、機熊解析に十分な細胞数が得られなかった。そこで、これまで報告されているサイトカイン刺激によるCD14+CD16+の誘導を利用し表面マーカーや機能解析を試みた。通常のプラスチック皿では付着細胞が優位となるため、テフロン加工の培養皿を用いた。既報告のM-CSF/IL-4やTGFβでは若干の誘導しかみられなかった。しかし、M-CSF/TGFβ、あるいはM-CSF/IL-10、M-CSF/TGFβ/IL-10では十分量のCD14+CD16+が誘導された。一方、プロスタグランディンはCD16+の発現を強く抑制し、培養3日目には大部分がCD14++CD16-細胞となった。M-CSF/TGFβ/IL-10で誘導されたCD14+CD16+細胞をフローサイトメトリーにて表面マーカーを測定するとCD80+,CD1a-であり、ケモカイン受容体の発現はCXCR3-,CCR4^<weak+>,CCR5++,CCR6^<weak+>であった。サルコイドーシスの病変部に証明される菌体成分であるムラミルジペプタイド(MDP)にて、正常人から得たCD14+CD16+細胞を刺激し、IL-1β、IL-6、TNF-α、GM-CSFの産生能をELISA法にて測定したが有意な産生は見られなかった。以降、平成16年度に本細胞を用いて機能解析を進める計画である。
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