サルコイドーシスの病態形成における単球亜群の関与についての検討

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15591200
• 研究機関: 関西医科大学
• 研究代表者: 岡本 祐之 関西医科大学, 医学部, 助教授 (10142291)
• キーワード: 単球 / CD14+CD16+ / サイトカイン / 肉芽腫 / サルコイドーシス / MDP

研究概要

CD14^+CD16^+単球は抗原提示能を持つproinflammatoryな亜群と考えられており、結核やAIDS、川崎病などの炎症性疾患や感染症で増加することが知られている。サルコイドーシス患者の末梢血を調べると、CD14^+CD16^+単球が血清ACE値と有意な相関をもって増加することを報告した。そこで、単球亜群の肉芽腫形成に関わるCD14+CD16+単球の役割をin vitroにて検討する。患者末梢血から磁気細胞分離システムを用いて全単球を分離後、フローサイトメトリーにてCD16+細胞を回収したが、機熊解析に十分な細胞数が得られなかった。そこで、これまで報告されているサイトカイン刺激によるCD14+CD16+の誘導を利用し表面マーカーや機能解析を試みた。通常のプラスチック皿では付着細胞が優位となるため、テフロン加工の培養皿を用いた。既報告のM-CSF/IL-4やTGFβでは若干の誘導しかみられなかった。しかし、M-CSF/TGFβ、あるいはM-CSF/IL-10、M-CSF/TGFβ/IL-10では十分量のCD14+CD16+が誘導された。一方、プロスタグランディンはCD16+の発現を強く抑制し、培養3日目には大部分がCD14++CD16-細胞となった。M-CSF/TGFβ/IL-10で誘導されたCD14+CD16+細胞をフローサイトメトリーにて表面マーカーを測定するとCD80+,CD1a-であり、ケモカイン受容体の発現はCXCR3-,CCR4^<weak+>,CCR5++,CCR6^<weak+>であった。サルコイドーシスの病変部に証明される菌体成分であるムラミルジペプタイド(MDP)にて、正常人から得たCD14+CD16+細胞を刺激し、IL-1β、IL-6、TNF-α、GM-CSFの産生能をELISA法にて測定したが有意な産生は見られなかった。以降、平成16年度に本細胞を用いて機能解析を進める計画である。

研究成果

• [文献書誌] Hiroyuki Okamoto et al.: "Langhans-type and foreign-body-type multinucleated giant cells in cutaneous lesions of sarcoidosis."Acta Dermtologica Venereology. 83. 171-174 (2003)
• [文献書誌] Hiroyuki Okamoto et al.: "Monocyte-derived multinucleated giant cells and sarcoidosis"J Dermatol Sci. 31. 119-128 (2003)
• [文献書誌] Hiroyuki Okamoto et al.: "Circulating CD14+ CD16+ Monocytes Are Expanded in Sarcoidosis Patients"J Dermatology. 30. 503-509 (2003)
• [文献書誌] Kana Mizuno et al.: "Ultraviolet B Radiation Suppresses Endocytosis, Subsequent Maturation, and Migration Activity of Langerhans cell-like Dendritic Cells"J Invest Dermatol. (In press). (2004)
• [文献書誌] Kana Mizuno et al.: "Inhibitory influences of xanthine oxidase inhibitor and ACE inhibitor on multinucleated giant cell formation from monocytes by downregulation of adhesion molecules and purinergic receptors"Brit J Dermatol. (In press). (2004)