| 研究概要 |
メラノサイトの増殖・分化にはケラチノサイトが重要な働きをtていると考えられるが、このことを培養系で検討した。C57BL/10JHir系統のブラックのマウスを繁殖させ、新生児皮膚より表皮細胞浮遊液を得て、未分化なメラノブラストを培養した。また、別個に表皮細胞浮遊液からケラチノサイトを無血清初代培養し、純粋集団になってから培養皿よりトリプシン-EDTAを用いてはがし混合培養した。未分化なメラノブラストはケラチノサイトによって増殖が促進されたが、ケラチノサイトの代わりにエンドセリンー1を加えて培養してもメラノブラストの増殖が促進された。同様に新生児皮膚より表皮細胞浮遊液を得て、分化したメラノサイトをメラノサイト増殖培養液で培養し、別個に表皮細胞浮遊液からケラチノサイトを無血清初代培養し、メラノサイトと混合培養した。この場合もケラチノサイトがメラノサイトの増殖を促進したが、ケラチノサイトがなくてもエンドセリンー1があればメラノサイトの増殖が促進されることが分かった。また、メラノサイト刺激ホルモン(MSH)はケラチノサイト存在下でメラノサイトの分化を促進することも明らかになった。この結果をふまえてケラチノサイトに由来するMSHと協同作用するメラノサイト分化促進因子について検討した。分化のマーカーとレては、メラニン量やメラニン産生に重要なチロシナーゼ,チロシナーゼ関連タンパク質1および2などの酵素の活性を調べた。その結果、エンドセリンー1がケラチノサイトに由来するメラノサイト分化促進因子の一つであることがわかった。また、エンドセリンー1の抗体をケラチノサ1イトとメラノブラスト・メラノサイトの混合培養に加えたところメラノブラスト・メラノサイトの増殖およびメラノサイトの分化が抑制された。同様な方法を用いて、エンドセリンー2、エンドセリンー3,白血病阻害因子、肝細胞増殖因子、幹細胞増殖因子、顆粒球マクロファージコロニー形成促進因子等がその因子であることが示された。これらの結果から、メラノサイトの増殖・分化はケラチノサイトによって支配されており、そのケラチノサイト由来因子の候補として、エンドセリンー1、エンドセ旦ンー2、エンドセリンー3,白血病阻害因子、肝細胞増殖因子、幹細胞増殖因子、顆粒球マクロファージコロニー形成促進因子等が考えられる。
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