| 研究課題/領域番号 |
15591388
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
消化器外科学
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
山田 博之 東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 助手 (70313244)
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| 研究分担者 |
植竹 宏之 東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 助手 (60311651)
長内 孝之 東京医科歯科大学, 学院医歯学総合研究科, 助手 (50301164)
小嶋 一幸 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 講師 (60313243)
杉原 健一 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (10171167)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2004
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| キーワード | Tissue Microarray / 免疫組織学的実験 / ドナーブロック / アレイブロック / レシピエントブロック / 癌関連蛋白 |
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| 研究概要 |
本研究では胃癌症例41症例(いずれも性別・年齢、胃癌の深達度、リンパ節転移の有無、予後の明らかな症例のうちから、分化型胃癌20例、未分化型胃癌21例)を対象とした。最初に腺管や間質などの組織構造が判別可能な直径2回の組織片約100個をレシピエントブロックに埋め込むことにより、組織構造も考慮し。たアレイを作製することを目的とした。まず、Manual tissue arrayerを用いてそれぞれのドナーブロッ クの予めマーキングした部位を直径2回の中空針で1、2箇所くり抜き、I個のレシピエントブロックに埋め込み、48個の組織切片の載ったアレイブロックを作成した。アレイのデザインは組織型別、胃癌の進行度順に配列した。次にアレイブロックを薄切し、各組織切片がプレパラート上に存在しているかを検討したところ、全ての組織切片が破壊されることなく3μm厚で複数回薄切することが可能であった。ドナーブロックとアレイブロックの腫瘍細胞密度、腫瘍腺管密度を検鏡して比較したところ、全ての組織切片で強い相関を示したことで、アレイブロックはドナーブロックの組織学的構造を良好に反映していることが明らかになり、胃癌組織においてTissue arrayの作成は可能であることが判明した。続いて行った、免疫組織学的検討では、ドナーブロック、アレイブロックの染色性は抗p53抗体、抗Ki67抗体に関しては、染色スコアに強い相関がみられた(p<0.0005)。抗Cox2抗体に関してもArea、Intensityとも染色スコアに強い相関がみられた(p<0.0001)。以上のことから、Tissue Microarrayは免疫組織学的検討を行う上での有用な実験系であることが示された。
現在この結果を基に、胃癌の主要抗腫瘍薬である5-FUの関連酵素(Thyin idyl ate Synthase、Dihydropyri midine Dehydrogenase、Thymidine phosphorylase)およびVGEF-Cの発現をTissue inicroarray法により評価し、臨床病理学的因子との比較検討を進めている。
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