2003 年度実績報告書

ヒト口腔扁平上皮癌に対するp27^<Kipl>発現増強を目差した分子標的治療法の開発

研究課題

研究課題/領域番号	15592116
研究機関	徳島大学
研究代表者	原田耕志徳島大学, 歯学部, 助手 (60253217)
キーワード	変異型p27^<Kipl> / 遺伝子治療 / プラスミドベクター / Skp2 / 口腔扁平上皮癌
研究概要	口腔扁平上皮癌患者81例において免疫組織学的に治療前腫瘍細胞のp27^<Kipl>蛋白ならびにSkp2の発現を検索した。その結果p27^<Kipl>蛋白は非転移例(n=38;p<0.01)、非進展例(n=34;p<0.01)、経過良好例(n=62;p<0.05)において高い発現を示し、またp27^<Kipl>高発現例(n=51)は5年生存率81.0%であり、低発現例(n=30)の58.6%に比して(p<0.05)高い生存を示した。一方Skp2は転移例(n=43;p<0.05)、進展例(n=47;p<0.05)、死亡例(n=19;p<0.05)において高い発現を認め、またSkp2低発現例(n=43)の5年生存率は84.5%であり、高発現例(n=38)の32.0%に比較して高い生存を示した(p<0.01)。なおp27^<Kipl>ならびにSkp2の発現は逆相関を示した(p<0.05)。以上よりp27^<Kipl>ならびにSkp2は口腔扁平上皮癌細胞の転移、病期、治療経過と緊密に関連しており、臨床上有用な予後因子となりうる可能性が示唆された。次に、様々な癌におけるp27^<Kipl>蛋白の発現減弱は、主にユビキチンによる分解であることが知られているためp27^<Kipl>蛋白の分解を抑制することによる癌悪性度への影響につき検討した。まずユビキチンによるp27^<Kipl>蛋白の分解を抑制するために、ユビキチンが結合するアミノ酸187番をスレオニンからメチオニンに変異させた変異型p27^<Kipl>蛋白を発現するプラスミドベクターを構築し、口腔扁平上皮癌細胞に導入し、野生型の場合と比較した。その結果、変異型p27^<Kipl>導入細胞は、野生型p27^<Kipl>導入細胞に比較して、MTT assayにて強い増殖抑制効果が、Flow cytometryにて強いG1期停止が、Boyden chamberにて強い細胞移動能の減弱が、Out growth assayにて強いアウトグロースの抑制が見られ、さらにヌードマウスモデルにおいても、著明な抗腫瘍効果を認めた。以上より、p27^<Kipl>蛋白の発現減弱の頻度が高い口腔扁平上皮癌細胞において、変異型p27^<Kipl>を応用した遺伝子治療は有効である可能性が示唆された(日本癌治療学会札幌にて報告・Oral Oncolin press)。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Supriatno: "Characteristics of Antitumor Activity of Mutant Type p27^<Kipl> Gene in an Oral Cancer Cell Line"Oral Oncology. (in press).
[文献書誌] Koji Harada: "Combined effects of the oral fluoropyrimidine anticancer agent, S-1 and radiation on human oral cancer cells"Oral Oncology. (in press).
[文献書誌] Koji Harada: "Overexpression of iNOS Gene Suppresses the Tumorigenicity and Metastasis of Oral Cancer Cells"In Vivo. (in press).
[文献書誌] Shin-ich Kawaguchi: "Overexpression of Tuberous Sclerosis Complex 2 Exerts Antitumor Effect on Oral Cancer Cell Lines"Oral Oncology. 39. 836-841 (2003)
[文献書誌] Koji Harada: "Antitumor effect of cepharanthine on human oral squamous cell carcinoma cell lines by induction of cyclin-dependent kinase inhibitor p27^<Kipl>"Anticancer Research. 23. 1441-1448 (2003)
[文献書誌] Supriatno: "Effect of p27^<Kipl> on the Ability of Invasion and Metastasis of an Oral Cancer Cell Line"Oncology Reports. 10. 527-532 (2003)
[文献書誌] 佐藤光信: "口腔外科 YEAR BOOK"癌の遺伝子治療の最新の進歩頭頸部癌""クインテッセンス出版株式会社. 4 (2003)

2003 年度 実績報告書

ヒト口腔扁平上皮癌に対するp27^<Kipl>発現増強を目差した分子標的治療法の開発

研究代表者

原田 耕志 徳島大学, 歯学部, 助手 (60253217)

研究成果

[文献書誌] Supriatno: "Characteristics of Antitumor Activity of Mutant Type p27^<Kipl> Gene in an Oral Cancer Cell Line"Oral Oncology. (in press).

[文献書誌] Koji Harada: "Combined effects of the oral fluoropyrimidine anticancer agent, S-1 and radiation on human oral cancer cells"Oral Oncology. (in press).

[文献書誌] Koji Harada: "Overexpression of iNOS Gene Suppresses the Tumorigenicity and Metastasis of Oral Cancer Cells"In Vivo. (in press).

[文献書誌] Shin-ich Kawaguchi: "Overexpression of Tuberous Sclerosis Complex 2 Exerts Antitumor Effect on Oral Cancer Cell Lines"Oral Oncology. 39. 836-841 (2003)

[文献書誌] Koji Harada: "Antitumor effect of cepharanthine on human oral squamous cell carcinoma cell lines by induction of cyclin-dependent kinase inhibitor p27^<Kipl>"Anticancer Research. 23. 1441-1448 (2003)

[文献書誌] Supriatno: "Effect of p27^<Kipl> on the Ability of Invasion and Metastasis of an Oral Cancer Cell Line"Oncology Reports. 10. 527-532 (2003)

[文献書誌] 佐藤光信: "口腔外科 YEAR BOOK"癌の遺伝子治療の最新の進歩 頭頸部癌""クインテッセンス出版株式会社. 4 (2003)

2003 年度実績報告書

原田耕志徳島大学, 歯学部, 助手 (60253217)

[文献書誌] 佐藤光信: "口腔外科 YEAR BOOK"癌の遺伝子治療の最新の進歩頭頸部癌""クインテッセンス出版株式会社. 4 (2003)